膜片鉗技術之全細胞記錄的實驗流程：（1）仔細檢查實驗系統各儀器間的線路連接。（2）依次打開各儀器的電源開關和實驗軟件，檢查各參數的初始設置。（3）將樣品置于倒置顯微鏡的載物臺上。（4）電極安裝。（5）偏移電位的補償和電極電阻的測定：在微操縱器控制下使微電極進入浴液，電流基線通常會立刻漂離零位，若此時處于VC模式，在維持電壓為零時，通過調節偏移電位補償，使電流基線等于零，此時可見基線上疊加有響應電流方波。（6）細胞封接。（7）電極電容補償：若無特殊要求，一般將保持電位設為受試細胞靜息電位平均值。膜片鉗和電壓鉗的區別：電壓鉗技術只能用來研究整個細胞膜或一大塊細胞膜上所有離子通道活動。廈門醫學膜片鉗成像設計公司

在進行細胞吸附式膜片鉗記錄時，一般來說，我們通過電壓鉗（voltageclamp,VC）模式將細胞膜電位維持在-60mV（大多數脊椎動物神經元的靜息膜電位），從而保證通過電極尖銳端的電流即為跨膜離子流。一般來說，細胞吸附式膜片鉗可以作為對照來驗證其他單通道記錄構型下通道活動的改變情況，也可以用來檢測化學物質引起的通道的和活動/對通道活動的影響是否經過胞內信使的介導。這里有一點需要注意，每個待研究細胞的Em都會有輕微的差異，因此我們在分析cell-attached的數據的時候，需要拿出事先記錄好的Em，一般有三種方法:用胞內記錄或全細胞記錄的方法，獲得一個平均Em；在實驗結束時，patch破裂，在電流為0的情況下記錄到的電勢就為Em;結合離子通道的其他數據來反向推算Em。廈門醫學膜片鉗成像設計公司使用膜片鉗全細胞記錄技術觀察拮抗劑對煙堿受體激動劑量效曲線的影響，來確定其作用的動力學特征。

膜片鉗實驗的細胞膜型：一個完整的細胞膜電學模型包含幾個基本組分：膜電容，膜電阻和膜電勢。這三個電學組分形成的原因各不相同：1、膜電容（membranecapacitance,Cm）的形成是由于生物膜為磷脂雙分子層，對離子和其他水溶性物質均不通透，遂使細胞膜成為了電的不良導體，進而導致細胞外液-磷脂雙分子層-細胞內液構成了細胞膜電容。Cm的大小與細胞膜表面積成正比，與磷脂雙分層的厚度成反比。膜電容在這里的作用，主要為完成細胞的充放電過程。2、膜電阻（membraneresistance,Rm）的形成是由于細胞膜上的蛋白質通道，也就是離子通道的存在。離子和小的極性分子只有通過通道才能進出細胞膜，因此膜電阻在這里的作用，主要就是控制離子的進出。3、膜電勢（membranepotential,Vm）又稱膜電位，源自膜內外離子濃度的差異，離子濃度的差異又源于細胞膜對離子的選擇透過性。膜電位一般可分為靜息電位、動作電位和等級電位（不懂的自己去查，此處不贅述）。膜電位的作用主要是維持神經元的興奮性，并改變離子通道的狀態。

膜片鉗使用的注意事項：1.為了防止塵埃、靜電傷害機器，每天做實驗前請用清水拖地。2.拉制儀使用前需預熱15-30min。3.銀絲電極及地線發白時，請先用砂紙輕微打磨，再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀，如果銀絲電極30min未變黑，則考慮更換次氯酸鈉。4.先開放大器，后開軟件；先關軟件，后關放大器。5.非必須用到汞燈時請不要打開汞燈電源，打開后至少需1個小時才可關閉。6.在放大器打開時不能用手、金屬物品或其它導電的物品接觸電極絲（包括地線），在取放細胞片時請關閉放大器。膜片鉗技術用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接，被孤立的小膜片面積為微米數量級，因此封接范圍內細胞膜光有少數離子通道。全自動膜片鉗系統技術指標：擴展功能多。配套擴展設備豐富，如內灌流系統、脂質體制備器等。

膜片鉗電生理紀錄系統及記錄方法：細胞膜由雙層脂膜組成，具有密封絕緣的特性，因此當紀錄 電極接觸到細胞膜時電阻會開始上升，然后以人工方式對紀錄電極內施加一個負壓，可以讓電極與胞膜之間吸附得更為緊密而電阻也會加速上升，當紀錄電極的電阻達到千兆歐姆(Giga Ω)時，意味著細胞膜與電極之間幾乎沒有電流漏出，之后對電極內壓力施以一個快速的負壓將細胞膜吸破，這樣紀錄電極與細胞胞體之間會形成一個封閉的電容，此時就可以開始對細胞進行實驗。全自動膜片鉗系統技術指標：外灌流時間常數：~200ms；內灌流時間常數：~2s。廈門醫學膜片鉗成像設計公司

膜片鉗技術的應用范圍：對單細胞形態與功能關系的研究。廈門醫學膜片鉗成像設計公司

膜片鉗使用的注意事項：工作原理膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。它的基本原理是以一個光潔，直徑約為0.5~3um的玻璃微電極同神經或肌細胞的膜接觸，之后對微電極另一端開口處施加適當的負壓用電極的纖細開口將與電極接觸的那一小片膜輕度吸入，如此在微電極開口處的玻璃邊沿以及這一小片膜周邊會形成緊密的封接，它的電阻能夠達到數個或數十個千兆歐，這世界上就是在化學上完全隔離了吸附在微電極開口處的那一片膜同膜的其余部分，通過微電極記錄到的電流變化光光和該膜片中通道分子的功能狀態相關聯。膜片鉗技術用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接，被孤立的小膜片面積為微米數量級，因此封接范圍內細胞膜光有少數離子通道。廈門醫學膜片鉗成像設計公司

上海司鼎生物科技有限公司屬于醫藥健康的高新企業，技術力量雄厚。司鼎生物是一家有限責任公司（自然）企業，一直“以人為本，服務于社會”的經營理念;“誠守信譽，持續發展”的質量方針。公司擁有專業的技術團隊，具有免疫印跡（WB)技術服務，熒光定量PCR技術服務，膜片鉗電生理技術服務，在體光纖成像記錄技術服務等多項業務。司鼎生物順應時代發展和市場需求，通過**技術，力圖保證高規格高質量的免疫印跡（WB)技術服務，熒光定量PCR技術服務，膜片鉗電生理技術服務，在體光纖成像記錄技術服務。