膜片鉗芯片技術是繼細胞芯片之后的又一種嶄新的分析細胞電生理參數的芯片技術。由于該芯片除了具有傳統膜片鉗的高分辨和高準確性特點外,還具有高通量、自動化以及細胞多通道參數和細胞網絡參數在線和實時檢測等優點.因此,該芯片技術將很大促進細胞離子通道、細胞網絡傳導以及藥物篩選的研究和應用。具體介紹了膜片鉗芯片技術的發展及其應用,結合研究工作,著重介紹了膜片鉗芯片技術在味覺細胞研究的比較新進展,并結合神經芯片研究細胞網絡的方法,對采用膜片鉗芯片技術在細胞和分子水平上研究味覺的敏感機理和傳導機制的應用前景進行了展望。膜片鉗技術是用來研究單個離體的活細胞、組織切片或細胞膜片離子流的電生理實驗技術。蕪湖神經生物學實用膜片鉗供應商
一種電生理膜片鉗灌流裝置的制造方法:為了測量在不同藥物對細胞中的離子通道的影響,通常都需要在膜片鉗實驗中實施灌流。例如,需要檢驗某種是否對某種離子通道的影響,則需要在細胞封接后記錄電流數據,然后通過在細胞周圍快速給藥再次記錄電流數據即可對比數據判斷該對離子通道的影響。以往多采用橡皮泥等簡單設備固定灌流管進行實驗,經常出現灌流管固定不良影響實驗的情況,也有精密的灌流裝置,但是結構復雜,且成本非常高。蕪湖神經生物學實用膜片鉗供應商膜片鉗使用操作注意:拉制儀提前預熱(至少30min)。且用完及時關閉。
膜片鉗的應用:在心血管藥理研究中的應用:隨著膜片鉗技術在心血管方面的普遍應用,對血管疾病和藥物作用的認識不只得到了不斷更新,而且在其病因學與藥理學方面還形成了許多新的觀點。正如諾貝爾基金會在頒獎時所說:“Neher和Sadmann的貢獻有利于了解不同疾病機理,為研制新的更為有效的藥物開辟了道路”。創新藥物研究與高通量篩選:在離子通道高通量篩選中主要是進行樣品量大、篩選速度占優勢、信息量要求不太高的初級篩選。較近幾年,分別形成了以膜片鉗和熒光探針為基礎的兩大主流技術市場。將電生理研究信息量大、靈敏度高等特點與自動化、微量化技術相結合,產生了自動化膜片鉗等一些新技術。
膜片鉗的應用:與藥物作用有關的心肌離子通道:心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩態的維持而保持正常的功能。國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展,使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究:通過對各種生理或病理情況下細胞膜某種離子通道特性的研究,了解該離子的生理意義及其在疾病過程中的作用機制。如對鈣離子在腦缺血神經細胞損害中作用機制的研究表明,缺血性腦損害過程中,Ca2+介導現象起非常重要的作用,缺血缺氧使Ca2+通道開放,過多的Ca2+進入細胞內就出現Ca2+超載,導致神經元及細胞膜損害,膜轉運功能障礙,嚴重的可使神經元壞死。膜片鉗使用操作注意:電腦里面的軟件不得隨意刪改。
電壓鉗與膜片鉗有什么區別?電壓鉗技術是通過向細胞內注射一定的電流,抵消離子通道開放時所產生的離子流,從而將細胞膜電位固定在某一數值。由于注射電流的大小與離子流的大小相等、方向相反,因此它可以反映離子流的大小和方向。膜片鉗技術鉗制的是膜片,是指采用尖銳端經過處理的微電極與細胞膜發生緊密接觸,使尖銳端下的這片細胞膜在電學上與其它細胞膜分離,這很大程度降低了背景噪聲,使單通道微弱的電流得以分辨出來。采用電壓鉗技術將這片膜的電位鉗制在某一數值,可記錄到單通道電流。從這點上看,膜片鉗技術是特殊的電壓鉗技術。隨著膜片鉗技術的發展,它已經不只只局限于膜片的概念,也不只只采用電壓鉗技術,還常采用電流鉗技術。全自動膜片鉗系統技術指標:進行細胞吸附、封接和維持全細胞記錄模式。并兼容常規膜片鉗放大。蕪湖神經生物學實用膜片鉗供應商
全自動膜片鉗系統技術指標:藥液交換迅速。細胞內、外液的交換是在平面芯片上進行。蕪湖神經生物學實用膜片鉗供應商
膜片鉗技術基本原理與特點:膜片鉗技術本質上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區別關鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細胞膜面積不同,進而所研究的離子通道數目不同。電壓鉗技術主要是通過保持細胞跨膜電位不變,并迅速控制其數值,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或一大塊細胞膜上所有離子通道活動。目前電壓鉗主要用于巨大細胞的全性能電流的研究,特別在分子克隆的卵母細胞表達電流的鑒定中發揮著其他技術不能替代的作用。該技術的主要缺陷是必須在細胞內插入兩個電極,對細胞損傷很大,在小細胞如神經元,就難以實現,又因細胞形態復雜,很難保持細胞膜各處生物特性的一致。蕪湖神經生物學實用膜片鉗供應商
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