GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯的GalNAcEXO酶，用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基，而不會用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶，可快速有效地水解來自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達，帶有His標簽，分子量為52 kDa。 該酶在 Tn 抗原和 α1-3 連接末端 GalNAcs 上均顯示活性。在這里，我們展示了如何使用GalNAcEXO來表征復雜的生物制藥。西妥昔單抗的所有N-聚糖（包括Fab-聚糖）在Genovis固定化PNGase F10分鐘內完全去除。云南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

我們展示了使用兩種蛋白作為底物的OmniGLYZOR的性能。依那西普是一種 Fc 融合蛋白，含有 TNFα 受體的胞外結構域。該結構域用 2 個 N-糖和 8-11 個 1 個具有不同程度唾液酸化的 O-聚糖修飾。在 37°C 下將這種重糖基化蛋白在 OmniGLYZOR Microspin 柱上孵育 1 小時，可完全去除所有 N-和 O-糖，如中級 LC-MS 分析所示。促紅xibao生成素 （EPO） 是一種攜帶 3 個 N-聚糖和 1 個he心 1 個 O-聚糖的小蛋白質，其總質量的近 40% 由聚糖組成。O-連接聚糖通常存在于蛋白質的暴露位置，因為它們在蛋白質折疊發生后附著。只有負責其合成的糖基轉移酶才能接觸到這些暴露的位點。云南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶，可消化攜帶粘蛋白型O-聚糖的蛋白。

ImpaRATOR 是一種 O-聚糖依賴性蛋白酶，可催化糖蛋白和糖肽中與糖基化絲氨酸或蘇氨酸殘基相鄰的肽鍵的水解。它切割用粘蛋白型O-聚糖修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基的N-末端，包括唾液酸化物種。粘蛋白型O-聚糖是ImpaRAT活性所必需的，該酶不會消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基，也不會在糖蛋白的N-糖基化位點。該酶接受 O-聚糖結構，包括唾液酸化he心 1 和he心 2 結構以及 Tn 抗原。Genovis的ImpaRATOR 來源于銅綠假單胞菌，在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽，分子量為 97 kDa。

Genvis測試去除唾液酸以揭示電荷變體：唾液酸是帶負電荷的糖殘基，存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會使分析工作流程復雜化，從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. 樣品中不含酶。因此，唾液酸的去除有助于研究蛋白質中的潛在變體。該應用展示了一種快速簡便的樣品制備方法，可在電荷異構體分析之前去除所有唾液酸。ImpaRATOR 酶不會消化未修飾的絲氨酸或蘇氨酸殘基，也不會在糖蛋白的N-糖基化位點。

用于水解離心柱中糖蛋白上的N-聚糖的固定化酶。 Genovis的PNGase F 固定化微離心柱含有與瓊脂糖珠共價偶聯的 PNGase F 酶，用于在樣品中酶峰減少的糖蛋白上水解 N-糖。 將糖蛋白樣品與PNGase F一起在離心柱中固定，然后通過離心步驟輕松收集去糖基化的蛋白質。由于空間位阻，PNGase F對某些糖蛋白的活性可能緩慢或受到抑制 - 在這些情況下可能需要更長的孵育時間或糖蛋白變性。 Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.2 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3.z終樣品中的酶峰減少。對天然糖蛋白或游離的聚糖結構上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。天津高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

使用OpeRATOR對胞生成素（EPO）進行O-糖位點特異性消化：確定中級水平的 O-糖基化位點。云南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究

與PNGase F類似，Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括：OmniGlyZOR 微離心柱；PNGase F 凍干；RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性，否則某些 N-糖基化位點很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進行O-糖位點特異性消化：對于jin攜帶一個或幾個 O-糖基化位點的簡單底物蛋白，OpeRATOR 也可用于繪制中間水平的 O-糖基化位點。 云南高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機理研究