GlycOCATCH?親和純化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽親和純化的富集樹脂。GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供。該產(chǎn)品包含：4 個 GlycOCATCH 親和純化微離心柱，每個柱能夠結(jié)合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白（總共 200 μg）。Genovis的SialEXO 凍干 200 單位，用于去除唾液酸；OpeRATOR 凍干 200 單位，用于結(jié)合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集；2. 復(fù)雜樣品的特異性凈化；3. 用于改進 MS 分析的樣品制備。O-糖基化蛋白和肽的特異性富集：O-連接聚糖參與多種生物過程，包括抑制病原體引起的gan染、炎癥反應(yīng)、造血和細(xì)胞信號傳導(dǎo)。OglyZOR 來源于口腔鏈球菌，在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽，分子量為 227 kDa。甘肅N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

為了證明Genovis的PNGase F凍干和PNGase F固定在各種底物上的去糖基化能力，用PNGase F凍干或PNGase F固定化處理了一系列糖蛋白。使用天然反應(yīng)條件在一小時內(nèi)有效去除曲妥珠單抗和依那西普上的所有N-糖，以及西妥昔單抗上的Fc-糖。當(dāng)加入RapiGest?并在變性條件下進行反應(yīng)時，西妥昔單抗的所有N-聚糖（包括Fab-聚糖）在PNGase F固定化10分鐘內(nèi)完全去除，PNGase F固定化15分鐘內(nèi)完全去除。在變性反應(yīng)條件下，PNGase F 在 30 分鐘內(nèi)成功將更復(fù)雜的 F 融合蛋白阿巴西普和阿柏西普去糖基化。使用變性和還原反應(yīng)條件，將常用的糖蛋白標(biāo)準(zhǔn)品RNase B在10或15分鐘內(nèi)完全去糖基化，分別使用PNGase F凍干或PNGase F固定化。在天然和變性條件下生成的去糖基化樣品與LC-MS分析兼容。河北凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究使用游離聚糖方法分析zhiliao性抗體曲妥珠單抗、Fc-融合蛋白依那西普和糖蛋白RNase B的N-聚糖。

Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶（O-糖苷酶），可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖，用于糖分析、確認(rèn) O-糖的存在和降低樣品的異質(zhì)性。Genovis的OglyZOR 是一種內(nèi)切糖苷酶（內(nèi)切-α-N-乙酰半乳糖氨酸酶），可催化來自天然糖蛋白的he心 1 和有限程度的he心 3 O-聚糖的水解。 OglyZOR酶活性需要去除唾液酸，因此，由唾液酸酶混合物組成的唾液酸凍干，用于去除α2-3，α2-6和α2-8連接的唾液酸，與OglyZOR一起提供。在pH 6.5至7.5和37°C下獲得良好活性。

Genovis的SialEXO固定化用于復(fù)雜糖蛋白的去唾液酸化：在設(shè)置反應(yīng)條件時，需要在所需的反應(yīng)時間和完成反應(yīng)所需的酶量之間進行權(quán)衡。較高的酶量可保證在更短的時間內(nèi)完成周轉(zhuǎn)，但會使下游分析復(fù)雜化。為了避免此類問題，我們以離心柱形式固定了活性SialEXO。這允許以更短的孵育時間孵育具有明顯更高量的唾液酸酶的糖蛋白底物。Genovis測試了 SialEXO 凍干和 SialEXO 固定化在人 C1 抑制劑上的性能。這種糖蛋白是一種具有挑戰(zhàn)性的底物，具有 6 個 N- 和多達(dá) 26 個 O-聚糖，由 α2,3 和 α2,6 連接的唾液酸修飾。對游離的N-聚糖的分析表明，SialEXO在溶液中完全脫唾液酸化，SialEXO固定化。人血清中 O-糖蛋白的富集：GlycOCATCH還可用于從復(fù)雜的樣品混合物（如人血清）中選擇性富集O-糖基化蛋白。

由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性，形成了重疊的肽，從而可以獲得O-糖位點的完整圖譜為了進行比較，相同材料的標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化物， 顯示難以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR進行O-糖位點定位：OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化絲氨酸和蘇氨酸糖基化位點的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。這會產(chǎn)生攜帶O-糖的糖肽，并能夠使用質(zhì)譜法進行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級分析。下面是OpeRATOR消解位點的示意圖。實現(xiàn)高通量 N-糖去除，簡化糖蛋白底物的下游分析。河北凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究

FucoseEXO固定在離心柱中，可快速方便地處理高達(dá)0.5mg的糖蛋白，然后在離心步驟中輕松收集消化的糖蛋白。甘肅N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

Fc N-聚糖在抗體的效應(yīng)功能中起著至關(guān)重要的作用，但可能會增加蛋白質(zhì)表征測定的復(fù)雜性。在天然條件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游離N-糖以及去糖基化抗體的功能和結(jié)構(gòu)。 為了證明PNGase F固定化和PNGase F凍干在天然反應(yīng)條件下有效去除Fc N-聚糖，對zhiliao性抗體曲妥珠單抗進行了處理。圖2中的質(zhì)量數(shù)偏移表明，在37°C下用Genovis的PNGase F凍干或PNGase F固定化孵育1小時后，曲妥珠單抗上的Fc N-聚糖成功去除，與在溶液中用PNGase F凍干處理的樣品相比，沒有酶干擾用PNGase F固定處理的樣品的分析。甘肅N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)