Genvis測(cè)試去除唾液酸以揭示電荷變體：唾液酸是帶負(fù)電荷的糖殘基，存在于 N- 和 O-連接的聚糖上。唾液酸的固有電荷可能會(huì)使分析工作流程復(fù)雜化，從而掩蓋其他重要的修飾。Microspin 色譜柱可用于 2 x 0.5 mg、5 x 0.5 mg 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白的去唾液酸化。1. 易于使用的離心柱；2. 提高酶與底物的比例，提高消化效率；3. 樣品中不含酶。因此，唾液酸的去除有助于研究蛋白質(zhì)中的潛在變體。該應(yīng)用展示了一種快速簡(jiǎn)便的樣品制備方法，可在電荷異構(gòu)體分析之前去除所有唾液酸。GalNAcEXO 酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila，在大腸桿菌中表達(dá)，帶有His標(biāo)簽，分子量為52 kDa。固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有瑞典Genovis、德國(guó)BASF、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物、中國(guó)金傳生物、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研、自產(chǎn)能力，批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇。遼寧固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶PNGase F酶在大腸桿菌中表達(dá)，該重組基因來(lái)源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。

由于蛋白質(zhì)的O-糖模式的異質(zhì)性和O-糖結(jié)構(gòu)的OpeRATOR特異性，形成了重疊的肽，從而可以獲得O-糖位點(diǎn)的完整圖譜為了進(jìn)行比較，相同材料的標(biāo)準(zhǔn)胰蛋白酶消化物， 顯示難以分析的少量且非常大的糖肽。使用Genovis的OpeRATOR進(jìn)行O-糖位點(diǎn)定位：OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化絲氨酸和蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的粘蛋白型 O-糖蛋白 N 端。這會(huì)產(chǎn)生攜帶O-糖的糖肽，并能夠使用質(zhì)譜法進(jìn)行O-糖分析、O-糖肽圖譜以及中級(jí)分析。下面是OpeRATOR消解位點(diǎn)的示意圖。

使用Genovis的OpeRATOR圖譜O-聚糖位點(diǎn)對(duì)依那西普進(jìn)行LC-MS分析：依那西普是一種 Fc 融合蛋白，具有高度 O-糖基化的鉸鏈區(qū)域。將依那西普與OpeRAT一起孵育，并使用LC-MS/MS分析所得糖肽。促紅xibao生成素 （EPO） 是一種具有單個(gè) O-糖基化位點(diǎn)的 ~30 kDa 糖蛋白。在PNGase F去除N-糖并使用SialEXO進(jìn)行去唾液酸化后，用OpeRAT消化天然蛋白，并通過(guò)反相LC-MS分析所得蛋白質(zhì)片段。O-糖基化的位點(diǎn)可以通過(guò)識(shí)別OeRATOR消化位點(diǎn)直接推斷出來(lái)。為了獲得良好性能，需要去除唾液酸助劑，因此購(gòu)買(mǎi)中包括2000個(gè)單位（如果SialEXO凍干）。1. 用于方法開(kāi)發(fā)的靈活產(chǎn)品形式；2. 可以結(jié)合酶以提高效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。O-聚糖是OpeRATOR活性所必需的，而該酶在N-聚糖上沒(méi)有活性。OpeRATOR和SialEXO處理后，O-糖基化蛋白被消化成攜帶O-聚糖的肽。消化發(fā)生在O-糖基化位點(diǎn)的N端。兩種酶都含有 His 標(biāo)簽，酶的分子量為 43 kDa 和 66 kDa。

SialEXO 2-3 在天然條件下水解糖蛋白，在 pH 值范圍為 7.0 至 9.0 時(shí)顯示出活性。該酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila，并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶具有 His 標(biāo)簽，分子量為 66 kDa。1. 用于方法開(kāi)發(fā)的靈活格式；2. 可以結(jié)合酶以提高用于離心柱中糖蛋白去唾液酸化的固定化酶。Genovis的SialEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的SialEXO酶，用于糖蛋白的去唾液酸化，而不會(huì)被酶污染z終制劑。它水解天然糖蛋白上的唾液酸（α2-3、α2-6 和 α2-8）并釋放出聚糖。效率；3. 適用于自動(dòng)化工作流程；4. 即用型 - 只需加水即可。FucosEXO 可在 1 至 2 小時(shí)內(nèi)水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 。遼寧固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶

GalNAcEXO 在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性，來(lái)源于Akkermansia muciniphila。固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)

GlycOCATCH設(shè)計(jì)用于特異性結(jié)合粘蛋白型O-糖基化蛋白和肽。親和樹(shù)脂基于無(wú)活性的Genovis的OpeRATOR酶，該酶經(jīng)過(guò)工程設(shè)計(jì)，可以高親和力結(jié)合O-糖基化蛋白和肽。 結(jié)合在pH 5-8的生理緩沖液中進(jìn)行。由于GlycOCATCH樹(shù)脂和O-糖蛋白/肽之間的強(qiáng)相互作用，可以用8M尿素進(jìn)行洗脫。或者，可以使用活性O(shè)peRATOR酶進(jìn)行洗脫，該酶消化O-聚糖位點(diǎn)的N末端結(jié)合的O-糖蛋白。在后一種情況下，肽在天然條件下回收。OpeRATOR 凍干酶包含在購(gòu)買(mǎi)中。由于 O-糖蛋白上的旋亞氨酸化 O-聚糖與樹(shù)脂結(jié)合效率更高，因此唾液酸酶混合物 SialEXO 凍干也包含在購(gòu)買(mǎi)中。固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)