Genovis的PNGase F 是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交體或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。 在反應(yīng)過程中,從中去除聚糖的天冬酰胺殘基被脫酰胺為天冬氨酸。釋放的低聚糖完好無損,可用于進(jìn)一步分析。N-糖的去除被用于MS分析的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)的異質(zhì)性,使游離的糖分析成為可能,并研究N-糖的功能作用。 該酶在大腸桿菌中表達(dá),該重組基因來源于伊麗莎白金氏腦膜敗血癥。 評價抗體片段對完整蛋白聚集的影響。 IgG1 mAb1和mAb2在Biogen生產(chǎn)。 mAb1被糖基化,主要的糖型是具有0和1半乳糖的he心聚焦雙觸角聚糖(FA2和FA2G1); mAb2被糖基化。采用合適的酶策略來去除這些GalNAc并簡化生物制藥的表征。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
Genovis的ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協(xié)同的作用:O-糖蛋白酶。使用ImpaRATOR或OpeRATOR消化后分析依那西普重糖基化區(qū)域O-聚糖位點(diǎn)的覆蓋率(圖3)。使用OpeRATOR鑒定對應(yīng)于所有13個O-聚糖位點(diǎn)的肽,而使用ImpaRATOR只能明確鑒定10個位點(diǎn)。ImpaRATOR 可能比 OpeRATOR (1) 具有更具選擇性的氨基酸序列偏好,此處由 S186 和 T245 位點(diǎn)缺乏消化來表明。此外,ImpaRATOR 在兩個相鄰的 O-糖基化氨基酸之間顯示出有限的裂解,如 S213 位點(diǎn)酶解肽的缺乏以及 T200 和 T217 位點(diǎn)酶解肽的低強(qiáng)度所證明的那樣。在OpeRATOR酶解樣品(T184-S199和T200-H204;圖2b和d),而在ImpaRATOR消化的樣品中,具有漏裂的相應(yīng)肽(S184-H204)的強(qiáng)度更高。 雖然OpeRATOR顯示出更高的O-聚糖位點(diǎn)覆蓋率,但使用ImpaRATOR進(jìn)行消化可以表征O-聚糖結(jié)構(gòu),包括唾液酸化物種。例如,條形圖插入顯示了兩種糖肽 T184-V198 和 T205-P207 的 O-聚糖種類。這應(yīng)該與使用OpeRATOR的消化進(jìn)行比較,在OpeRATOR中,必須去除唾液酸才能產(chǎn)生酶活性,這意味著有關(guān)唾液酸化的信息丟失。總而言之,ImpaRATOR 和 OpeRATOR 酶共同提供了有關(guān)聚糖組成和 O-聚糖位點(diǎn)的完整信息。陜西N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究用SialEXO處理血清,上樣于GlycOCATCH,洗滌,洗脫O-糖基化蛋白。Swiss Prot 數(shù)據(jù)庫鑒定蛋白質(zhì)列表。
α連接的Genovis的GalNAcs的水解:GalNAcEXO 是一種 α-N-乙酰半乳糖胺苷酶,可有效水解糖蛋白上的末端 GalNAc 殘基。與絲氨酸或蘇氨酸連接的 GalNAc(稱為 Tn 抗原)被 GalNAcEXO 快速有效地水解,并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。Genovis的GalNAcEXO 是一種外α-N-乙酰半乳糖胺酶,用于有效水解與糖蛋白(Tn 抗原)中的絲氨酸或蘇氨酸殘基相連的 α-N-乙酰半乳糖胺 (GalNAc)。該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAc 上顯示活性。GalNAcEXO 在天然條件下水解糖蛋白上的 GalNAc,在 pH 值 6.0 至 7.6 范圍內(nèi)具有高度活性。
Genovis的PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一種糖酰胺酶,可水解多肽天冬酰胺與所有哺乳動物天冬酰胺連接復(fù)合物、雜交或高甘露糖寡糖的內(nèi)層 GlcNAc 之間的酰胺鍵。該酶用于MS分析前的樣品制備,以降低蛋白質(zhì)異質(zhì)性并實(shí)現(xiàn)游離的聚糖分析,并研究N-聚糖的功能作用。1. 對所有哺乳動物N-聚糖的高效水解;2.對多種糖蛋白具有活性;3.可固定在即用型離心柱產(chǎn)品形式;4. 自動化友好型,96孔板,用于高通量 N-糖去除。Genovis的ImpaRATOR 是一種 O-糖依賴性蛋白酶,可消化攜帶粘蛋白型。O-聚糖的蛋白質(zhì),包括唾液酸化物質(zhì)、糖基化絲氨酸和 Thr 殘基的 N-末端。該酶產(chǎn)生攜帶 O-糖的糖肽,從而實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、位點(diǎn)占用測定和 O-糖肽圖譜以及使用 LC-MS 分析的中級方法。1. 特異性廣 - 接受多種 O-聚糖變體,包括唾液酸化物種;2. 可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的 N 末端;3. 穩(wěn)健的消化,增強(qiáng)復(fù)雜生物制藥的表征。OmniGLYZOR特點(diǎn):與LC-MS兼容;完全去除聚糖,改進(jìn)蛋白的分析;
Genovis 集團(tuán)由瑞典 Genovis AB 和美國全資子公司 Genovis Inc. 組成。該公司的在納斯達(dá)克北方增長市場上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關(guān)系。 Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具,以促進(jìn)和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis 酶產(chǎn)品,稱為 SmartEnzymes,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。 通過在2020年收購QED Bioscience,產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在 網(wǎng)站 上閱讀有關(guān)QED的更多信息 Genovis 研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系,使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點(diǎn)抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價值。GlycOCATCH的應(yīng)用包括O糖蛋白和肽的特異性富集或去除、糖組學(xué)、復(fù)雜樣品的研究和生物制藥的表征。凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
對天然糖蛋白或游離的聚糖結(jié)構(gòu)上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
G0F 抗體在 30 分鐘內(nèi):半乳糖的存在會影響zhiliao性抗體引發(fā)的效應(yīng)功能,為了研究抗體的作用方式,可能需要徹底去除半乳糖殘留物。Genovis的GalactEXO Immobilized 的 β1-4 半乳糖苷酶活性在曲妥珠單抗上使用 30 分鐘孵育證明。genovis的GalactEXO Immobilized 由強(qiáng)大的 GalactEXO 酶組成,該酶固定在瓊脂糖珠上,并以易于使用的微離心柱形式格式化。GalactEXO是β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白上的半乳糖殘基。使用FabRICATOR?將抗體消化成亞基,并使用LC-MS進(jìn)行分析。使用 GalactEXO 凍干和 GalactEXO 固定化都可以看到向 G0F 糖型的轉(zhuǎn)變,但后者在z終制劑中沒有留下酶。沒有任何半乳糖基化結(jié)構(gòu)表明半乳糖殘基完全水解,因此LC-MS數(shù)據(jù)中任何剩余的次要峰都可以注釋為亞基的糖化。沒有任何半乳糖基化結(jié)構(gòu)表明半乳糖殘基完全水解,因此LC-MS數(shù)據(jù)中任何剩余的次要峰都可以注釋為亞基的糖化。甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
陜西高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
甘肅高活性/無非特異酶活PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis
浙江PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)
吉林瑞典GenovisPNGaseF去糖基化酶
N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
青海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
安徽N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶
海南PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
安徽凍干粉形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究
固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究