Genovis的OglyZOR 是一種內切糖苷酶（O-糖苷酶），可特異性水解天然糖蛋白上的he心 1 O-聚糖。OglyZOR 用于去除 O-糖，用于糖分析、確認 O-糖的存在和降低樣品的異質性。Genovis的OglyZOR 是一種內切糖苷酶（內切-α-N-乙酰半乳糖氨酸酶），可催化來自天然糖蛋白的he心 1 和有限程度的he心 3 O-聚糖的水解。 OglyZOR酶活性需要去除唾液酸，因此，由唾液酸酶混合物組成的唾液酸凍干，用于去除α2-3，α2-6和α2-8連接的唾液酸，與OglyZOR一起提供。在pH 6.5至7.5和37°C下獲得良好活性。而用其他巖藻糖酶處理部分去除巖藻糖或根本沒有去除。遼寧PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

生成攜帶 O-糖的糖肽，該酶可實現 O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點占用測定，以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點的 N 末端；2.穩健的消化，增強復雜生物制藥的表征；3.高特異性 - 可靠的聚糖位點測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶，可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質，糖基化（he心 1）Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達。大腸桿菌。該酶含有 His 標簽，分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 Akkermansia muciniphila，并以 E 表達。大腸桿菌。SialEXO Lyophilized 中的酶也含有 His 標簽，這些組分的分子量分別為 43 kDa 和 66 kDa。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽的凍干酶。Genovis的OpeRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供，裝在 2000 個單位的小瓶中，用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。浙江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶使用FabRICATOR?將曲妥珠單抗消化成亞基，并使用LC-MS進行分析。

Genovis的SialEXO產品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。這些酶對天然糖蛋白或游離的聚糖結構上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。SialEXO用于在用OpeRATOR或OglyZOR消化之前預處理O-糖基化蛋白。其他應用包括降低樣品復雜性、電荷異構體分析和外切糖苷酶陣列。N-連接、O-連接和游離聚糖的高效去唾液酸化快速去除唾液酸，增強對蛋白質電荷變體的分析可固定在即用型離心柱中。然后可以用FabRICATOR消化所得的去糖基化蛋白，并通過中級質譜分析。我們將該工作流程應用于依那西普的分析，雖然未經處理的TNFR結構域過于復雜而無法分析，但O-聚糖組成可以在用PNGase F處理后進行分離和比較。

GlycOCATCH?親和純化：用于粘蛋白型O-糖蛋白和肽親和純化的富集樹脂。GlycOCATCH親和純化以方便的離心柱形式提供。該產品包含：4 個 GlycOCATCH 親和純化微離心柱，每個柱能夠結合 50 μg 粘蛋白型 O-糖蛋白（總共 200 μg）。Genovis的SialEXO 凍干 200 單位，用于去除唾液酸；OpeRATOR 凍干 200 單位，用于結合的 O-糖蛋白的可選洗脫方法。1. 靶向 O-糖蛋白富集；2. 復雜樣品的特異性凈化；3. 用于改進 MS 分析的樣品制備。O-糖基化蛋白和肽的特異性富集：O-連接聚糖參與多種生物過程，包括抑制病原體引起的gan染、炎癥反應、造血和細胞信號傳導。OglyZOR 是一種內切糖苷酶用于確認O-糖的存在和降低樣品的異質性。

Genovis的ImpaRATOR? 和 OpeRATOR? - 兩種協同的作用：O-糖蛋白酶。使用ImpaRATOR或OpeRATOR消化后分析依那西普重糖基化區域O-聚糖位點的覆蓋率（圖3）。使用OpeRATOR鑒定對應于所有13個O-聚糖位點的肽，而使用ImpaRATOR只能明確鑒定10個位點。ImpaRATOR 可能比 OpeRATOR （1） 具有更具選擇性的氨基酸序列偏好，此處由 S186 和 T245 位點缺乏消化來表明。此外，ImpaRATOR 在兩個相鄰的 O-糖基化氨基酸之間顯示出有限的裂解，如 S213 位點酶解肽的缺乏以及 T200 和 T217 位點酶解肽的低強度所證明的那樣。在OpeRATOR酶解樣品（T184-S199和T200-H204;圖2b和d），而在ImpaRATOR消化的樣品中，具有漏裂的相應肽（S184-H204）的強度更高。 雖然OpeRATOR顯示出更高的O-聚糖位點覆蓋率，但使用ImpaRATOR進行消化可以表征O-聚糖結構，包括唾液酸化物種。例如，條形圖插入顯示了兩種糖肽 T184-V198 和 T205-P207 的 O-聚糖種類。這應該與使用OpeRATOR的消化進行比較，在OpeRATOR中，必須去除唾液酸才能產生酶活性，這意味著有關唾液酸化的信息丟失?？偠灾琁mpaRATOR 和 OpeRATOR 酶共同提供了有關聚糖組成和 O-聚糖位點的完整信息。親和純化微離心柱，SialEXO 凍干 200 單位，OpeRATOR 凍干 200 單位。浙江固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶

FucosEXO 可在 1 至 2 小時內水解糖蛋白上的末端 α1-2,3,4 。遼寧PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis

蛋白質的N-糖基化特征是一個關鍵的質量屬性。它會影響生物制藥的安全性和有效性，因此需要在開發和生產過程中進行表征和監測。常見的聚糖分析工作流程是用PNGase F釋放N-聚糖，然后用熒光標記物（如2-AB、2-AA、普魯卡因胺或RapiFluor-MS?（沃特世公司））標記生成的聚糖。然后使用HILIC-HPLC或毛細管電泳分離標記的聚糖，以表征和定量不同的聚糖結構。 在這里，使用游離聚糖方法分析zhiliao性抗體曲妥珠單抗、Fc-融合蛋白依那西普和糖蛋白RNase B的N-聚糖。曲妥珠單抗和依那西普在天然條件下在37°C下用Genvois的PNGase F去糖基化1小時，而RNase B需要變性和還原才能完全去糖基化。因此，在50°C下用PNGase F去糖基化10分鐘之前，用RapiGest? SF表面活性劑（沃特世公司）和TCEP處理RNase B。 用RapiFluor-MS標記所得游離的聚糖，并通過HILIC UPLC-FLD-MS進行分析。遼寧PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis