抗體的氧化是可能影響抗體功能的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，需要密切定量和表征。它可能導(dǎo)致mAb的體內(nèi)半衰期、功效和穩(wěn)定性降低。Genovis的FabRICATOR（IdeS）消化產(chǎn)生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩(wěn)健性允許在受監(jiān)管的環(huán)境中監(jiān)測抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法（如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白）的表征、質(zhì)量控制、穩(wěn)定性測試、生產(chǎn)監(jiān)測和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個消化位點快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的片段池實現(xiàn)基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質(zhì)量控制可固定在即用型離心柱中Genovis的GlySERIAS可以對融合蛋白、多特異性抗體。吉林IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

用于IgA1和IgA2m1以上鉸鏈消化的凍干酶。與IdeS不同，Genovis提供的IgASAPSub1+2在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1和IgA2m1，產(chǎn)生完整且均勻的Fab和Fc片段。由于人IgA1的鉸鏈比IgA2的鉸鏈長，因此IgA1和IgA2m1之間來自消化位點的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育時間為過夜（16-18小時），并且由于酶的特異性，沒有過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值為6.0至8.0時具有活性，不需要還原條件或輔助因子即可產(chǎn)生活性。活性為37°C。IgASAPSub1+2是從丹毒梭菌克隆而來的，并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽，分子量為131kDa。IgASAPSub1+2凍干劑以凍干粉的形式提供，裝在1000個單位的小瓶中，用于消化1mgIgA1和IgA2m1。吉林IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)Genovis的FabRICATOR （IdeS） 酶已成為一種接受的快速表征單克隆抗體 （mAb） 的分析工具。

Genovis將固定化酶固定在磁珠上，用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設(shè)計，但在無法實現(xiàn)自動化的情況下，在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后，樣品可直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動進(jìn)樣器進(jìn)行快速色譜分析，或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風(fēng)險，并提高通量。

Genovis集團(tuán)由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達(dá)克上市。如需了解更多信息，請訪問投資者關(guān)系。Genovis的經(jīng)營理念是為生物制藥和研究行業(yè)的客戶提供工具，以促進(jìn)和節(jié)省開發(fā)新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產(chǎn)品，稱為SmartEnzymes，被世界各地的科學(xué)家使用，創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。通過在2020年收購QEDBioscience，產(chǎn)品組合已擴(kuò)大到包括用于研究、生物藥物開發(fā)和診斷檢測的抗體和試劑。在官網(wǎng)上閱讀有關(guān)QED的更多信息Genovis研發(fā)活動的基石是客戶關(guān)系，使產(chǎn)品開發(fā)能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發(fā)新工作流程和新靶點抗體的學(xué)術(shù)團(tuán)體的合作同樣有價值。用Genovis的GlySERIAS 消化，所有三個連接子區(qū)域均被消解。

Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE）與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 （2D-NMR） 之后，可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程，是評估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇，在海報“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基，促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化、氧化和非氧化樣品之間的差異，并通過觀察原子分辨率來比較原研劑和生物仿制藥的 HOS。如Thermo Scientific? KingFisher? ；在振動臺上也能同樣出色地工作。吉林IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

Genovis的FabRICATOR （IdeS）HPLC酶色譜柱，可快速進(jìn)行單克隆抗體的柱上酶切，并產(chǎn)生一致的亞基。吉林IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

Blinatumomab（一種對 CD19 和 T 細(xì)胞標(biāo)志物 CD3 具有特異性的 BiTE 分子）的研究級生物仿制藥在室溫下用固定化過夜的 Genovis的GlySERIAS 消化。通過LC-MS對消解樣品的直接分析表明，所有三個連接子區(qū)域均被消解，α-CD3 VL和VH鏈洗脫為一個色譜峰，α-CD19 VH和VL鏈作為單獨的峰洗脫。來自連接的 α-CD3 VH 和 α-CD19 VH 結(jié)構(gòu)域的小峰顯示該短連接子未完全消化，表明 GlySERIAS 對短連接子的活性較低。與完整的蛋白質(zhì)分析相比，四個結(jié)構(gòu)域的分離提供了具有單同位素分辨率的高質(zhì)量光譜。可以觀察到每個結(jié)構(gòu)域的幾個不同變體，剩余的連接子殘基數(shù)量不同。在色譜分離過程中，α-CD3 VH結(jié)構(gòu)域無法從α-CD19 VH結(jié)構(gòu)域完全基線分離，導(dǎo)致在相關(guān)質(zhì)譜中觀察到一些共洗脫。四個結(jié)構(gòu)域的分離產(chǎn)生了有關(guān)在完整蛋白質(zhì)水平上鑒定的蛋白質(zhì)修飾位置的信息。例如，在完整水平上鑒定的 37 Da 的蛋白質(zhì)修飾被分配給 α-CD3 VH 鏈。此外，240Da 和 320da 的兩個修飾分別被分配給 α-CD3 VL 結(jié)構(gòu)域。后者還含有一個帶有五六個組氨酸殘基的 His 標(biāo)簽。這些數(shù)據(jù)證明了使用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 對包含多個柔性連接子蛋白進(jìn)行質(zhì)量控制的中級工作流程的強(qiáng)大功能。吉林IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)