大多數(shù)zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架，雙特異性或多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性，例如單價結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對 Fc 糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化，這需要優(yōu)化以大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE） 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgG1，以產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數(shù)人IgG1 上也具有活性，其中鉸鏈區(qū)域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能，我們消化了不同的人IgG1抗體，并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質(zhì)片段生成和強大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。GlySERIAS酶能夠分離多功能融合蛋白的各個結(jié)構(gòu)域，以促進表征并增加對這些分子的理解。湖北GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

上海倍篤生物科技有限公司（簡稱“倍篤生物”），由中國科學院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士，于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材（如Genovis的IdeS酶），遵守相關(guān)法規(guī)要求，如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認證等，致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等，藥物研發(fā)領(lǐng)域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù)，以期與客戶共同協(xié)作，加快研發(fā)及生產(chǎn)進度，為客戶提供更多價值。廣東GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶用于生物藥研究，如Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應(yīng)和鑒定翻譯后修飾等。

Genovis除了提供IdeS酶以外，還提供很多種特異性蛋白酶，如半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA （IgdE）。IgdE 在鉸鏈正上方的一個特定位點消化人 IgG1，產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段的均質(zhì)池。它在pH值和鹽濃度范圍內(nèi)具有活性，不需要任何還原劑或輔助因子。因此，與許多其他常用的蛋白酶相比，F(xiàn)abALACTICA不需要任何優(yōu)化來避免過度消化。這使得FabALACTICA成為一種有吸引力的酶，例如在還原和非還原條件下的LC-MS分析、抗體高階結(jié)構(gòu)（HOS）的結(jié)晶和NMR研究、雙特異性或多特異性抗體的表征、單價結(jié)合研究和完整的Fc聚糖分析。

一些應(yīng)用（如結(jié)合研究）具有高度靈敏度，因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段。因此，Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供，可快速輕松地生成均質(zhì) F（ab'）2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR （IdeS），用于制備來自多種 IgG 的 F（ab'）2 和 Fc 片段（對于兔 IgG，請咨詢），而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進行處理 。 為了生成和純化完整的 F（ab'）2 和 Fc/2 片段，使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗，并通過 SDS-page 進行分析。首先，在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘，然后進行短離心步驟。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F（ab'）2 片段，并通過降低 pH 值，然后立即調(diào)整回中性 pH 值，一步洗脫結(jié)合的 Fc 片段。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過程大約需要 1 小時Genovis的策略是幫助客戶進行亞基分析，特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品，如IdeS蛋白酶。

與IdeS不同，Romiplostim 由四個相同的血小板生成素 （TPO） 受體結(jié)合肽和一個 Fc 片段組成，通過柔性聚甘氨酸序列連接在一起。與度拉糖肽類似，用 Genovis的GlySERIAS Immobilized 在 37°C 下過夜，或用 GlySERIAS 凍干 1 小時并在 37°C 下過夜消化該蛋白質(zhì)。 鏈間二硫鍵被還原，以便于通過反相LC-MS進行以下分析。與度拉糖肽的觀察結(jié)果類似，用固定化酶消化產(chǎn)生均質(zhì)的 Fc/2，剩下一個連接子殘基，此處為甘氨酸殘基。這有助于識別專門位于Fc區(qū)域的修改。用凍干酶消化 1 小時得到 Fc/2，剩余 4 個甘氨酸殘基和少量的 Fc/2 仍與一個 TPO 肽連接。另一方面，這使得研究 Fc/2 和第yi個肽之間的連接區(qū)域成為可能，而不會受到第二個肽的干擾。用 GlySERIAS 凍干液過夜消化產(chǎn)生 2 個 Fc/2 變體，分別剩下 4 個和 1 個甘氨酸殘基。根據(jù)消化時間的不同，使用凍干產(chǎn)物釋放的肽以五或七種變體存在，接頭中殘留的甘氨酸殘基數(shù)量不同，而使用固定化產(chǎn)物釋放的肽以四種變體存在。可精確定位特定的修飾。而無需肽圖分析，可以較少的手動操作時間快速完成。黑龍江FabULOUSIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供。湖北GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis提供FabRICATOR（IdeS）驗證包。三種不同批次的凍干酶，用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產(chǎn)生均質(zhì)的F（ab'）2和Fc片段。FabRICATOR酶已成為生物制藥行業(yè)中使用的工具，用于表征用于zhiliao用途的單克隆抗體、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制藥。每批FabRICATOR酶在釋放前都經(jīng)過嚴格的酶活性、特性和純度測試。FabRICATOR驗證試劑盒由三批凍干酶組成，使方法驗證更容易。每批都附有一份分析證書。QC應(yīng)用的簡化方法驗證；批次間變異性評估的理想形式；提高批量放行檢測性能的可信度。湖北GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學