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安徽FabRICATORIdeS蛋白酶

來源: 發布時間:2024年06月07日

大多數zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架,雙特異性和多特異性形式的開發正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化,這需要優化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性,它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并產生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性,通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現了完全消化,包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發中的用途。與 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。安徽FabRICATORIdeS蛋白酶

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如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,現在有了Genovis的一些新產品(IgA酶,IgM酶),其他的模式和分子形式(IdeS高通量的產品形式)來測定和監測許多不同的CQA,Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好,但如果分析團隊不能足夠快地處理它們,那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法,當然這些方法要快速,而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的,這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。安徽FabRICATORIdeS蛋白酶如mAb在生產或儲存過程中的氧化,它可能會影響zhiliao產品的質量。

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與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現額外的消化位點。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應,并鑒定翻譯后修飾。

不同于IdeS,Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1,在兩小時內產生完整的 Fab 和 Fc 片段,無需還原條件。該酶對具有突變鉸鏈區域的抗體(如 LALA 突變)具有活性,并啟用中級 LC-MS 來表征具有突變鉸鏈的抗體的關鍵質量屬性。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1 (...KSCDK / THTCPPCP...),生成完整的 Fab 和 Fc 片段。FabDELLO 是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單個消化位點是人 IgG1 的三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現額外的消化位點。FabDELLO在天然條件下具有活性,需要鈣離子的存在。在37°C和pH 7-8.5下獲得良好活性。FabDELLO 是從 Bdellovibrio 細菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽,分子量為 32 kDa。FabRICATOR MagIC磁珠含有Ides固定化酶專為自動化平臺(振動臺)而設計。

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Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個位點進行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過蛋白-蛋白相互作用與目標抗體工作,這說明了它的高特異性。事實上,它在單個位點消化意味著使用FabRICATOR時沒有過度消化的風險,其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應用。Genovis亞基分析比肽圖譜具有簡單快速的巨大優勢,更適用于高通量的檢測,并可用于支持肽圖分析。安徽FabRICATORIdeS蛋白酶

在抗體藥及核酸藥領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶。安徽FabRICATORIdeS蛋白酶

Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶 可用于 IgG 的所有人類亞類以及人源化和嵌合 IgG。該酶對其他物種的 IgG 也有活性,包括來自大鼠、猴子、兔子和綿羊的某些類別的 IgG。因此,FabRICATOR的高特異性在某些情況下會使其對鉸鏈區域的突變敏感,并損害酶活性。來自小鼠 IgG2a 和 IgG3 的片段可以由 FabRICATOR Z 生成,與 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化這些 IgG 方面具有更高的效率。然而,小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列,并且不被 FabRICATOR Z 消化。對于這種抗體種類,FabULOUS 和 FabULOUS Fab 試劑盒可用于制備 Fab 片段。安徽FabRICATORIdeS蛋白酶

標簽: 高鹽核酸酶
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