對于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說，Fab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰性。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個可觸及的賴氨酸位點消化人IgG1，在足夠溫和的還原條件下保留鏈內和鏈間二硫鍵，從而產生完整的Fab和Fc片段。對于融合蛋白，消化通常在鉸鏈上方獲得，但融合伴侶的結構和氨基酸序列可能導致其他暴露的消化位點。如果去除保守的 Fc N-聚糖，Fc 中的第二個切割位點也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時，并通過 HPLC 進行分析。Genovis發現大部分緩沖液與FabRICATOR活性兼容，已經測試了PBS和150mM 醋酸銨 pH7，也適用于FabRICATOR HPLC。福建GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

與IdeS不同，度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 （GLP-1） 分子組成，它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域，從而鑒定結構域特異性 PTM，用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性，使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖，并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明，使用GlySERIAS進行連接子消化后，肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點，這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體，其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外，還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化，但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。福建GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學Genovis提供的IgASAP Sub1+2 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgA1 和 IgA2m1，產生完整且均勻的 Fab 和 Fc 片段。

Genovis是一家瑞典生物技術公司，自2010年起，為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具，主要用于生物制藥行業和學術界。我們在全球范圍內提供創新的智能酶SmartEnzymes?，用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發、生產和質量控制。您可以在我們的網站上“Application頁面”獲得更多應用信息，如果您有興趣，可以和我們一起做一個“SmartStories”，也可以聯系我們。

抗體的氧化是可能影響抗體功能的關鍵質量屬性，需要密切定量和表征。它可能導致mAb的體內半衰期、功效和穩定性降低。Genovis的FabRICATOR（IdeS）消化產生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩健性允許在受監管的環境中監測抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產生均質的F（ab'）2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法（如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白）的表征、質量控制、穩定性測試、生產監測和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個消化位點快速–在30分鐘內生成均勻的片段池實現基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質量控制可固定在即用型離心柱中可在重鏈中 CH2 結構域下方的一個特定位點消化人 IgM，產生均質的 F（ab'）2 和 Fc 片段。

Genovis的FabRICATOR（IdeS）是一種獨特的酶，可在鉸鏈區域下方的特定位點消化IgG，產生均勻的F（ab'）2和Fc/2片段。除IgG外，沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內消化，如果孵育時間延長，則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG，因此保留了免疫反應性。在37°C下獲得良好的活性，但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種，我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的，并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽，分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式，由GenovisAB開發，用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,生成的片段可用于結晶和高階（HOS）NMR研究、結合研究等。福建GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis提供FabRICATOR Fab2試劑盒，這是IgG片段生成和純化的強大工具。福建GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

大多數商業zhiliao性抗體屬于IgG類，在Fc結構域中含有N-聚糖。一個重要的關鍵質量屬性是糖基化曲線，因為它會影響穩定性、溶解度、藥效學和藥代動力學特性。這種翻譯后修飾可能發生在生物工藝開發和制造過程中，因此需要密切監測。Genovis的FabRICATOR（IdeS）酶已成為一種被接受的快速表征單克隆抗體（mAb）的分析工具。FabRICATOR在鉸鏈下方消化IgG，產生F（ab'）2和Fc/2片段。單個FabRICATOR消解位點和質量譜的后續精度使Fc糖基化譜能夠檢測，從而可以監測批次間的一致性和其他關鍵質量屬性。福建GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學