聚合酶鏈式反應的試驗污染:PCR反應的很大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性,但令人腦袋不適的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產生。污染原因:標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器...
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發現,由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的...
膜片鉗技術與其他生物檢測技術的結合應用:1.膜片鉗與光學顯微成像技術結合應用:利用激光掃描共聚焦顯微鏡、雙光子顯微鏡、熒光顯微鏡等技術可以對細胞進行實時成像研究,將膜片鉗技術與光學顯微成像技術結合使用...
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性...
冷凍電子顯微技術學解析生物大分子及細胞結構的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構等幾個基本步驟。三維重構:數據處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質量密度圖,由二維圖...
胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結血液的液體部分,不含細胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對細胞生長至關重要的營養和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長因子對于培養細胞的維持和生...
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經...
膜片鉗電生理技術的樣本種類:從較早的肌細胞、神經元和內分泌細胞發展到血細胞、肝細胞、耳蝸毛細胞、胃壁細胞、上皮細胞、內皮細胞、免疫細胞、精母細胞等多種細胞;從急性分散細胞和培養細胞發展到組織片乃至整體...
Real-time PCR:1.DNA或RNA的定量分析:Real-time PCR包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動植物轉基因拷貝數的檢測,RNAi基因失活率的檢測等;2.基因表達差異分析:例...
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發現,由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的...
膜片鉗芯片技術是繼細胞芯片之后的又一種嶄新的分析細胞電生理參數的芯片技術。由于該芯片除了具有傳統膜片鉗的高分辨和高準確性特點外,還具有高通量、自動化以及細胞多通道參數和細胞網絡參數在線和實時檢測等優點...
冷凍電鏡技術測定結構的幾種方法:X射線晶體學、NMR、和冷凍電鏡技術各有優缺點,將這幾種方法結合共同研究結構與功能將使結構生物學家對所研究的分子有更為全部的理解,而這些信息是單用任何一個方法所無法獲得...
冷凍電鏡技術的應用情況:近年來,冷凍電鏡技術在全球范圍被大眾所熟知,并且被越來越多的學術界和跨國制藥企業所采用。在藥物研發方面,多個跨國公司已經將冷凍電鏡技術用于藥物發現。雖然冷凍電鏡技術屬于前沿技術...
如何區別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的...
引物的設計對于這個實驗至關重要,因為Real-time PCR的檢測靈敏度比較高,所以相應的對引物設計的要求就很高。普通的要求規則大家都知道,還有幾點必須注意:1,引物的錯配率(引物錯配形成引物二聚體...
膜片鉗的數據如何處理:1)細胞吸附式膜片(cell attached patch)是膜片鉗的基本方式,其它方式由此衍生。這種膜片形式比較穩定因細胞骨架及有關代謝過程是完整的,故對細胞結構和環境干擾比較...
冷凍電鏡技術測定結構的幾種方法:X射線晶體學、NMR、和冷凍電鏡技術各有優缺點,將這幾種方法結合共同研究結構與功能將使結構生物學家對所研究的分子有更為全部的理解,而這些信息是單用任何一個方法所無法獲得...
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現的幾率。血清融化過程中...
Real-time PCR鏈式反應的常見問題:靶序列變異:如靶序列發生突變或缺失,影響引物與模板特異性結合,或因靶序列某段缺失使引物與模板失去互補序列,其PCR擴增是不會成功的。假陽性:出現的PCR擴...
冷凍電鏡技術的應用情況:近年來,冷凍電鏡技術在全球范圍被大眾所熟知,并且被越來越多的學術界和跨國制藥企業所采用。在藥物研發方面,多個跨國公司已經將冷凍電鏡技術用于藥物發現。雖然冷凍電鏡技術屬于前沿技術...
細胞培養用到的胎牛血清需要滅活嗎:細胞培養胎牛血清是不可或缺重要培養基,胎牛血清中含有諸多細胞生長因子,維生素,氨基酸等物質。我們常會看到胎牛血清的標注上有對產品滅活也有沒有滅活的,胎牛血清為什么不需...
冷凍電子顯微鏡技術之樣品成像:低劑量輻照成像,普通的樣品材料在進行TEM表征時,電子劑量越高,成像質量越好。但生物樣品受到的輻照損傷卻是和累積的輻照總劑量相關的。更詳細一點說,隨著輻照劑量的增加,輻照...
聚合酶鏈式反應生物學研究的歷史中占據了重要的地位。以此為基礎發展出包括Real-time PCR在內的多項應用技術。自誕生后Real-time PCR技術持續發展,從簡單的增擴到整個PCR過程,Rea...
選購胎牛血清:為了保證胎牛血清產品的均一性和穩定性,胎牛血清生產需遵循相關規定進行操作。一般來說,胎牛血清制備需經過以下幾個步驟:采集,離心,分離,無菌過濾,用來制作血清的牛血,是通過采集多頭牛的血液...
膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的較重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規膜片鉗技術(Conventionalpatchclamptechnique)發展到全自動膜片鉗技術(Aut...
胎牛血清應該如何保存,可以存放多久?胎牛血清可長期儲存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,請不要超過一個月。如果一次性無法用完一瓶血清,建議將胎牛血清無菌條件下分裝并儲存于-20℃,避免反...
腦片膜片鉗實驗全細胞記錄:用可視化膜片鉗尋找清楚、且表面光滑、折光性較好的突觸后神經元。在加了正壓后,將記錄電極移入腦片視野中,并接近事先選好的神經元,然后,調整電極與神經元的相對位置,利用負壓形成穩...
Real-time PCR的染料法和探針法的選擇:進行mRNA表達量的測定,采用染料法是比較經濟實惠的;染料法可以通過比較熔解曲線的熔解峰位置得到產物特異性的情況;目的基因和內參基因分管檢測,染料法可...
冷凍電鏡技術之冷凍蝕刻電子顯微鏡:冷凍蝕刻電鏡技術是從50年代開始發展起來的一種將斷裂和復型相結合的制備透射電鏡樣品技術,亦稱冷凍斷裂或冷凍復型,用于細胞生物學等領域的顯微結構研究。冷凍蝕刻電鏡的優點...
PCR的反應條件:dNTP濃度過高會加快反應速度,但同時還可以增加堿基的錯誤摻入率。引物濃度過高會引起錯配和非特異性產物擴增。TaqDNA聚合酶濃度過高會引起錯配和非特異性產物擴增,低則合成產物量減少...