HE染色原理1、細胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。2、細胞漿染色的原理:伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質等電點(4.7—5.0)以下時,胞漿蛋白質以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現紅色。冰凍組織切片的HE染色。廣東質量好的HE染色公司
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中**基本、使用*****的技術方法。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態結構特點均可顯示出來。貴州專業的HE染色服務HE染色規范化流程以及注意事項。
HE染色知識點1:對送檢組織標本的要求送檢組織標本在手術切除或活檢后應當立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定。尸檢標本應當盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,應當在送檢單上注明,有特殊要求(如細菌培養、解釋道化學分析等)應當事先聯系,并且在標本未固定前進行處理。知識點2:組織取材要求在對送檢組織標本進行詳細檢查的基礎上,根據診斷的需要,確定取材的部位和塊數。切取的組織應當按照不同的部位分別給予不同的編號或標記,以便鏡檢時核對。另外,盡可能在取材前對有意義的標本的表面及剖面鏡下攝影,并編號存檔南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。
HE染色反藍的原理:蘇木素染液,細胞核內的染色質主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結構中,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結合在細胞上的染液,但是在細胞核中結合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細胞核和細胞漿染色的分明,把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使色素與組織解離,分化不可過度。藍化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態,在堿性條件下處于藍色離子狀態,而呈藍色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色,稱藍化作用,一般多用自來水浸洗即可變藍,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍。腎臟組織HE染色如何觀察。
HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內的核糖體和細胞質染色的方法。H:Hematoxylin,蘇木精E:Eosin,伊紅蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細胞核和細胞內核糖體染成藍紫色,被堿染料染色的結構具有嗜堿。伊紅(,E)是一種酸染料,能將細胞質染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結構具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發生退行變則呈現嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現透明變時,伊紅著色由淺變深。HE染色,優先南京英瀚斯生物。貴州專業的HE染色服務
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HE染色常見問題:Q5:細胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍不足導致。應該立即更換蘇木素染色液。或在流動自來水(一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調至4.6-5.0。根據以上提示,調整實驗步驟。廣東質量好的HE染色公司