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上海專業(yè)的HE染色服務

來源: 發(fā)布時間:2025年05月04日

HE染色常見問題:Q5:細胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍不足導致。應該立即更換蘇木素染色液。或在流動自來水(一般自來水PH7.5-7.8),或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,調(diào)整實驗步驟。脾臟組織HE染色如何觀察。上海專業(yè)的HE染色服務

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HE染色細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深。陜西結果客觀的HE染色HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實驗方法。

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HE染色觀察細胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后,在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備:對于貼壁細胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細胞長于玻片上,然后用藥物誘導細胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞,用藥物誘導細胞凋亡后,離心1000r/min收集細胞,用PBS洗2次,收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學顯微鏡下,貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細胞,整個細胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質顏色加深等。

HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質與胞質內(nèi)的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中**基本、使用*****的技術方法。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結構特點均可顯示出來。冰凍組織切片的HE染色。

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HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,固定過久,導致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。心臟組織HE染色如何觀察。上海專業(yè)的HE染色服務

科研常備實驗操作之HE染色。上海專業(yè)的HE染色服務

HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標志性結構——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結構。人的肝小葉之間結締組織少,小葉分隔不明顯,但動物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結構。肝細胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細胞。20倍物鏡下,肝細胞內(nèi)染色為藍色的是細胞核,細胞核大而圓,居中,異染色質少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細胞胞質豐富,多成嗜酸性,當?shù)鞍踪|合成旺盛時,胞質內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質。肝細胞內(nèi)有豐富的細胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質網(wǎng),等等,但是在光鏡下是無法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當然,肝小葉內(nèi)除了肝細胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細胞等組織形態(tài),但是在HE染色時并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細胞形態(tài)是否完整、胞核有無增大、肝小葉形態(tài)是否完整,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。上海專業(yè)的HE染色服務

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