溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對(duì)于高濃度(達(dá) 百分之十)達(dá)分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時(shí),向超濾裝置中導(dǎo)入氣壓,大于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)將被截留在容器內(nèi),水及小于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)(如鹽分)會(huì)被過(guò)濾并排出。加壓拌式設(shè)計(jì)防止?jié)饪s的樣品發(fā)生沉淀,比離心超濾溫和,對(duì)于高濃度、易沉淀樣品的進(jìn)一步濃縮同時(shí)脫鹽等應(yīng)用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經(jīng)處理后反復(fù)使用,更為經(jīng)濟(jì)。超濾濃縮管哪家比較靠譜?普陀區(qū)默克超濾濃縮管代理商
Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而精細(xì),蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒(méi)有做相關(guān)的測(cè)試,所以無(wú)法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì),不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。徐匯區(qū)默克超濾濃縮管規(guī)格益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮管的特點(diǎn)。
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 溫和的磁力攪拌避免發(fā)生聚集和剪切變性 所有型號(hào)都可以高壓滅菌 提供 3 種規(guī)格共選擇,用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達(dá) 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應(yīng)用: 大分子(如蛋白、酶、抗體和***)溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾(Diafiltration)模式 非連續(xù)滲濾是換液的一種操作方法,即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積,并多次重復(fù)這個(gè)操作,直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續(xù)滲濾(保持恒定體積)是將超濾杯經(jīng)轉(zhuǎn)換裝置(目錄號(hào)6003)與補(bǔ)液杯(目錄號(hào)6028)連接, 使供氣壓和液體流轉(zhuǎn)。連接有轉(zhuǎn)換裝置時(shí),不必停下系統(tǒng)的運(yùn)轉(zhuǎn)就可以即時(shí)進(jìn)行濃縮和滲濾之間的切換,將兩種操作模式的優(yōu)點(diǎn) 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。
Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯(cuò)誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式樣品吸附損失小; 合理的死體積設(shè)計(jì),避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 設(shè)計(jì)精巧、緊湊,一體化結(jié)構(gòu)確保不會(huì)發(fā)生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。 對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。
超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分子大小為**基本的考慮。超濾膜截留1-1000kDa(MW)的分子,鹽和水等小分子會(huì)透過(guò),因此在大分子樣品處理中得到了應(yīng)用。膠狀或微粒狀物質(zhì)也能夠被截留。UF膜既可以用于透過(guò)樣品也用于保留樣品的純化。樣品***小于膜孔徑,則經(jīng)過(guò)膜處理可以達(dá)到除熱源、澄清和與大分子污染物的分離的效果。如果目的分子遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膜孔徑,膜處理則可以將小分子污染物去除而目的分子被濃縮。超濾方法相比沉淀法對(duì)于樣品更溫和,沒(méi)有發(fā)生容易導(dǎo)致生物大分子失活的相變,而且在濃縮的同時(shí)可以完成對(duì)溶質(zhì)的除鹽。超濾的應(yīng)用不限于蛋白樣品的操作,也常用于核酸樣品制備,包括分子克隆和質(zhì)粒純化。DNA和RNA樣品起始濃度低至5ng/mL也可以被高效地在數(shù)分鐘內(nèi)被濃縮,回收率達(dá)到99%以上。益啟生物公司專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。崇明區(qū)Merck離心濃縮管參數(shù)
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外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *普陀區(qū)默克超濾濃縮管代理商
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