Amicon? Pro純化超濾管簡(jiǎn)明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含65分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾，這個(gè)時(shí)候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]益啟生物公司專(zhuān)業(yè)致力于超濾濃縮管代理銷(xiāo)售。奉賢區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話

抗體標(biāo)記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心，總耗時(shí)~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對(duì)于比較稀釋的樣品（< 1 mg/mL） - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗體樣品， 4,000×g離心15 min。 ? 對(duì)于濃度較高的的樣品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（建議使用50k MWCO）中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL；死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。 奉賢區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話益啟生物公司專(zhuān)業(yè)從事超濾濃縮管代理銷(xiāo)售。

樣品的澄清、過(guò)濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC（0.5mL）和Ultrafree?-CL（2mL）是一次性使用的微濾離心管，可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經(jīng)經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理的產(chǎn)品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡(jiǎn)便、樣品回收率高且重復(fù)性很好，是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無(wú)菌包裝和非無(wú)菌包裝形式產(chǎn)品 過(guò)濾速度快，數(shù)據(jù)穩(wěn)定、重現(xiàn)性好 上樣體積為0.5mL (MC)或2mL (CL) 配合1.5mL離心管固定轉(zhuǎn)子(MC)或15mL離心管轉(zhuǎn)子使用 頂蓋顏色標(biāo)識(shí)易于區(qū)分膜孔徑

這種小管適合在1.5mL離心機(jī)中使用，其Ultracel?超濾膜對(duì)于蛋白及其它成分都表現(xiàn)出 極低的非特異性結(jié)合，連同醫(yī)藥級(jí)O型圈封閉設(shè)計(jì)，確保更少的樣品丟失，更穩(wěn)定的數(shù)據(jù)結(jié)果。諸多考慮周到的精細(xì)設(shè)計(jì)使Microcon?成為比較好用的樣品制備工具之一。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 低吸附膜和反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì)，即使是小體積、低濃度樣品得率也能達(dá)到95%以上 可以用產(chǎn)品自帶的1.5mL樣品收集管存儲(chǔ)濾過(guò)液和濃縮產(chǎn)物 濃縮倍數(shù)可達(dá)100X 操作簡(jiǎn)便快捷，易于標(biāo)準(zhǔn)化。 Microcon? DNA Fast Flow 超濾管 專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于從含有SDS的溶液中濃縮和回收基因組DNA。管子和膜均為低非特異性吸附的材質(zhì)，醫(yī)用級(jí)O型圈密封，保證了在洗滌步驟中樣品丟失**少。反轉(zhuǎn)回收設(shè)計(jì)，即使樣品量很小也能獲得理想的得率，濃縮倍數(shù)可以達(dá)到20X。超濾濃縮管的好處都有很多。

膜的吸附損失 對(duì)于濃度很低及珍貴的樣品，除了考慮截留效率和操作方便外，額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對(duì)目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對(duì)生物分子吸附程度不同，默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類(lèi)膜中對(duì)生物分子吸附**小，是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對(duì)溶質(zhì)的 吸附對(duì)樣品收率會(huì)產(chǎn)生直接影響，所以如果希望盡可能提高得率，就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置，同時(shí)保證一定的流速。默克密理博設(shè)計(jì)了一系列 離心式或攪拌式裝置，配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統(tǒng)，支持您獲得理想的處理效果。上海超濾濃縮管供應(yīng)商。楊浦區(qū)默克2ml超濾濃縮管批發(fā)

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上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 用Protein A或G對(duì)抗體進(jìn)行親和純化奉賢區(qū)默克離心濃縮管聯(lián)系電話

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