外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?上海離心濃縮管報價
特點與優點 溫和的磁力攪拌避免發生聚集和剪切變性 所有型號都可以高壓滅菌 提供 3 種規格共選擇,用于濃縮 3mL - 400mL 及更大體積樣品 濃度達 10% 的溶液依然可以獲得高流速 應用: 大分子(如蛋白、酶、抗體和***)溶液的濃縮和緩沖液置換 滲濾(Diafiltration)模式 非連續滲濾是換液的一種操作方法,即先濃縮到一定濃度再稀釋到起始的體積,并多次重復這個操作,直到溶液中的鹽或溶劑被 去除或降到需要的濃度。而連續滲濾(保持恒定體積)是將超濾杯經轉換裝置(目錄號6003)與補液杯(目錄號6028)連接, 使供氣壓和液體流轉。連接有轉換裝置時,不必停下系統的運轉就可以即時進行濃縮和滲濾之間的切換,將兩種操作模式的優點 集中在一起,有利于敏感的(蛋白)樣品在**恒定、溫和的條件下高效換液。徐匯區超濾濃縮管聯系電話上海超濾濃縮管銷售公司。
操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現在,TFF 技術被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]超濾濃縮管的好處有很多。
Centrifree?過濾器 Centrifree? 過濾器擁有研究及體外診斷證書(美國適用),是為臨床研究實驗室的樣品制備而設計的,能夠快速、高效地通過超濾去除小體積(0.15–1.0 mL)血清、血漿等生物樣品中的蛋白未結合的小分子溶質。數分鐘之內完成精確的分離,樣品終體積約為 10μL;不會發生樣品稀釋、pH 值變化、離子成分變化或未結合小分子溶質濃縮等情況。這種產品使用的是低吸附的再生纖維素膜,親水膜和 O 型圈,不含增塑劑,確保獲得較好的樣品回收效果。 優點與應用: 分離血清、血漿等生物學樣品中未 吸附的小分子物質 精確的藥物結合實驗樣品制備使用 去除生物樣品中的蛋白質等大分子 的干擾,減少樣品復雜性 測 定 游 離 型 智療 藥 物、睪 丸 基素、 甲 狀 腺 素 等,用 于 生 物 活 性 研 究、 藥物結合分析等新藥評估過程上海超濾濃縮管代理銷售推薦益啟生物公司。徐匯區超濾濃縮管聯系人
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***的化學兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝,避免使用膠水 帶來的化學溶出對樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩定,化學 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應用(提供實驗報告作為參考) Amicon? Ultra 離心超濾管: ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質的濃縮 ? 游離標記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發生滲漏,即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩定,數據平行性、重現性好,適合精細操作和 高通量操作上海離心濃縮管報價