創新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統 Amicon? Pro 純化超濾系統 目前的蛋白純化常常包括很多步驟，用到多種器具，卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉移帶來的各種風險，減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費的時間，默克密理博的研發團隊創新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標準化操作，使純化濃縮蛋白變得簡便高效，數據穩定易得。 開放的設計使您可以根據實際需要靈活使用，Amicon?Pro將成為實驗室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。超濾濃縮管的好處您了解多少呢？青浦區默克0.5ml超濾濃縮管咨詢問價

用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的，微觀結構緊密，確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度（如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL）的樣品進行脫鹽和濃縮，Biomax?聚苯醚砜（PES）超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養基等，都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *膜的常規截留分子量為5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直徑分為25,44.5,47,63.5和76mm。徐匯區濃縮管咨詢問價你知道超濾濃縮管的用途嗎？

無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達到更好的得率和操作體驗。 樣品體積大于 30mL 時可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內時吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應抗體的磁珠進行親和純化精制。

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾），請參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準，相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費，不亦樂乎？超濾濃縮管的優缺點您知道嗎？

核苷酸截留分子量（NCO） 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標定的，適合各種蛋白研究，但在核酸 和多糖純化時則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結構容易漏 過，相對于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實質是溶質累積在膜表面造成的堵塞，產生除了膜本身截留分 子量以外的過濾限制。當溶質濃度較高時，會形成相當于第二層濾膜作 用的膠體層，干擾分子通過濾膜，同時降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會影響目的分子的狀態而使濃差極化現象加劇或減輕。超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。江蘇默克離心濃縮管批發

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提供的超濾管是沒有經過去內***處理的，同時由于內***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會增強，對于這種情況，可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進行實驗，通過減小膜面積來降低非特異性吸附。青浦區默克0.5ml超濾濃縮管咨詢問價