外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾），請參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂乎？上海超濾濃縮管哪家比較專業(yè)。靜安區(qū)默克15ml超濾濃縮管聯(lián)系人

對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說明書。另提供AAV（腺相關(guān)***）的制備方法供參考。 去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì)，當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度（Critical Micelle Concentration, CMC）時(shí)，去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象，這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析，可用緩沖液或Milli-Q?水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在，用0.1 N NaOH清洗，然后用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。江蘇默克2ml超濾濃縮管聯(lián)系電話Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽！

無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細(xì)胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據(jù)樣品的粘稠程度，以及需要制備的目標(biāo)外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便達(dá)到更好的得率和操作體驗(yàn)。 樣品體積大于 30mL 時(shí)可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管，請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內(nèi)時(shí)吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進(jìn)一步提高特定外泌體的純度，可選用包被相應(yīng)抗體的磁珠進(jìn)行親和純化精制。

操作模式 常規(guī)與切向流 : 常規(guī)溶液過濾（NFF）中液體在壓力或真空驅(qū)動(dòng)下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上，小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預(yù)過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾（TFF） 液體流過時(shí)與膜表面呈一定角度，被膜阻擋的大顆粒物不會(huì)累積在膜表 面，而且還會(huì)被切向流從膜表面掃除，因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法，而現(xiàn)在，TFF 技術(shù)被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設(shè)計(jì)中，使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。超濾濃縮管零售多少錢呢？

這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡化往往帶來更好的結(jié)果，數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體，減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差，使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化，數(shù)據(jù)結(jié)果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。超濾濃縮管的系列有很多。普陀區(qū)Merck離心濃縮管聯(lián)系電話

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特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管，沒有死體積，用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實(shí)際應(yīng)用中還常用于大分子與其它分子的分 離，比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等。靜安區(qū)默克15ml超濾濃縮管聯(lián)系人