截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,從而導(dǎo)致排阻增加。比如,有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化,而另一些則發(fā)生解聚(如血紅素蛋白)成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn),我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先,再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。益啟生物公司主營(yíng)超濾濃縮管銷售。南京默克0.5ml超濾濃縮管參數(shù)
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí),需要謹(jǐn)慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多,我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過濾時(shí)間。徐匯區(qū)濃縮管訂購(gòu)您知道益啟生物公司的超濾濃縮管系列都有哪些嗎?
大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL;死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同,樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設(shè)計(jì),加快處理速度;反轉(zhuǎn)離心操作進(jìn)一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個(gè)產(chǎn)品替代傳統(tǒng)的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術(shù)和方法,是非常方便的工具。 特別推薦的應(yīng)用: 色譜洗脫產(chǎn)物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養(yǎng)上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細(xì)胞裂解液澄清
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計(jì)使換液過程更溫和 快速:從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液超濾濃縮管和其他的空壓機(jī)有什么區(qū)別呢?
抗體標(biāo)記 適合25-200μg樣品操作 5次低速離心,總耗時(shí)~50分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 加入抗體樣品 ? 對(duì)于比較稀釋的樣品(< 1 mg/mL) - 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)。 - 加上至多1 mL抗體樣品, 4,000×g離心15 min。 ? 對(duì)于濃度較高的的樣品(≥ 1 mg/mL) - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 - 在Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(建議使用50k MWCO)中加入至多100μL樣品。 大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL;死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。 超濾濃縮管服務(wù)電話是多少呢。徐匯區(qū)濃縮管訂購(gòu)
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Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯(cuò)誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式樣品吸附損失小; 合理的死體積設(shè)計(jì),避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 設(shè)計(jì)精巧、緊湊,一體化結(jié)構(gòu)確保不會(huì)發(fā)生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。南京默克0.5ml超濾濃縮管參數(shù)
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