外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾），請參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準，相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費，不亦樂乎？益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。浦東新區Merck超濾濃縮管批發

經典離心濃縮裝置 Amicon? Ultra 離心超濾管 反轉離心回收 ?反轉離心回收設計使蛋白樣品，特別是小體積樣品高效 回收，避免***頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤 ?0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設計為反轉回收模式 樣品吸附損失小 ?Ultracel? 超濾膜為密理博超濾產品特有的設 計，非特異吸附比較低，減少樣品的吸附損失 ?膜和聚丙烯管都是低吸附材質，保證> 90% 回收率 ?豎膜切向流設計，不像橫膜那樣容易堵，樣品 損失少 ?濃縮速度超快，**少需 10 分鐘奉賢區默克4ml超濾濃縮管聯系人益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。

離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”，操作時樣品首先被濃縮，繼而加入新的溶液，再次濃縮時，原溶液已經被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復雜，過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發生反應而產生溶出污染。關于默克密理博各種微濾、超濾產品的化學相容性請參考產品使用說明書或垂詢技術支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質，但膜的很多特性會對這一目的產生影響。影響回收的因素包括：? 標稱分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）? 截留 ? 濃差極化 ? 通量

通量（超濾效率）及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積，使用高 NMWL 濾膜可以增加通量，但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多，包括： 壓力：較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時，流量隨著跨膜壓力 （TMP）的增大而增加。正壓條件下操作，如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯， 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***，通量會達到一個平臺，甚 至可能隨著壓力的增加而降低。超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。

Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜，生產工藝嚴格，截留分子量明確而精細，蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，那么這兩個蛋白的大小需要相差多少？ 按照經驗，建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級（10倍）。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的，但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試，所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計，不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶，建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時，以完全滅活RNA酶；殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮管的特點。虹口區Merck超濾濃縮管

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Minicon?濃縮器 Minicon? 濃縮器用于在電泳或免疫電泳分析前對尿液和腦脊液進行濃縮，以增強對不正常或病態的蛋白質（例如尿中的 Bence Jones 蛋白）的識別。B15型有 8 個濃縮單元，用于 5mL 樣本的處理；CS15型有 10 個濃縮單元，適合 2.5mL 樣品的處理。溶劑和鹽分通過超濾被吸收劑吸收而樣品被濃縮。 優點與應用 靜態濃縮器，不需要其它輔助裝置 濃縮倍數達到 100 倍，樣品終體積小 同時濃縮多個臨床樣品 特別推薦用于尿液、腦脊液等的蛋白 富集分析浦東新區Merck超濾濃縮管批發

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