芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè);
單分子的檢測(cè)原理:由Simoa數(shù)字免疫分析法實(shí)現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過(guò)。簡(jiǎn)而言之,類(lèi)似免疫分析中的酶-底物反應(yīng)是在相對(duì)較大的反應(yīng)體積(50-100μL)中進(jìn)行的,在信號(hào)生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號(hào)分子的擴(kuò)散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下,Simoa通過(guò)將單獨(dú)標(biāo)記的免疫復(fù)合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應(yīng)中的擴(kuò)散。當(dāng)單一酶標(biāo)簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時(shí),產(chǎn)生的熒光團(tuán)被限制在孔中,從而在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生可測(cè)量的熒光信號(hào)。多指標(biāo)高通量數(shù)字 ELISA 芯片單個(gè)樣本可測(cè) 2-8 個(gè)指標(biāo),片內(nèi)反應(yīng)檢測(cè)推動(dòng)設(shè)備小型化。單分子技術(shù)數(shù)字ELISA高速檢測(cè)
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個(gè)病毒顆粒,相當(dāng)于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開(kāi)發(fā)能夠測(cè)量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標(biāo)記復(fù)制,11,12或測(cè)量整體、結(jié)合標(biāo)記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標(biāo)記物,已將蛋白質(zhì)的檢測(cè)范圍擴(kuò)展至低飛摩爾水平;更近使用該技術(shù)的一篇報(bào)道展示了檢測(cè)到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達(dá)到的靈敏度然而,檢測(cè)蛋白質(zhì)仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測(cè)到6,19。單個(gè)蛋白質(zhì)分子的分離和檢測(cè)為測(cè)量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 皮克級(jí)數(shù)字ELISA多重檢測(cè)POCT 芯片搭配小型化設(shè)備,即時(shí)檢測(cè) hs-cTnT 等指標(biāo),為急診救治提供快速數(shù)據(jù)支持。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)
我們已經(jīng)開(kāi)發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測(cè)方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測(cè)方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開(kāi)發(fā)這些試驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑(檢測(cè)試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個(gè)相互競(jìng)爭(zhēng)的因素。首先,足夠的珠子必須在場(chǎng)以從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看,100μL中有20萬(wàn)個(gè)珠子,每個(gè)珠子大約有8萬(wàn)個(gè)與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。
單分子陣列化技術(shù):磁珠捕獲與信號(hào)放大的**支撐,單分子陣列化技術(shù)作為數(shù)字ELISA芯片的底層架構(gòu),通過(guò)微米級(jí)捕獲結(jié)構(gòu)與二次流原理,實(shí)現(xiàn)磁珠的高密度穩(wěn)定捕獲。在芯棄疾單分子芯片中,該技術(shù)使單個(gè)芯片承載數(shù)十萬(wàn)磁珠,每個(gè)磁珠作為**反應(yīng)單元,***放大熒光信號(hào),降低背景噪聲。反應(yīng)后磁珠與量子點(diǎn)陣列的協(xié)同作用,進(jìn)一步提升檢測(cè)靈敏度,IL-6檢測(cè)中0.2pg/ml的低濃度樣本仍能呈現(xiàn)清晰的熒光信號(hào)梯度。該技術(shù)不僅確保了單分子級(jí)別的檢測(cè)精度,更通過(guò)陣列化設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)高通量并行反應(yīng),為低豐度蛋白的統(tǒng)計(jì)分析提供了充足的數(shù)據(jù)量,成為突破傳統(tǒng)ELISA檢測(cè)上限的關(guān)鍵技術(shù),支撐芯片在超敏檢測(cè)與多重分析中的優(yōu)異表現(xiàn)。5)數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒,微量樣本可同時(shí)測(cè)2-4個(gè)指標(biāo);
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)
由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區(qū)分“開(kāi)啟”和“關(guān)閉”孔變得具有挑戰(zhàn)性,我們達(dá)到了數(shù)字動(dòng)態(tài)范圍的實(shí)際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號(hào)偏離了線性。因此,這里使用50,000個(gè)孔展示的數(shù)字線性動(dòng)態(tài)范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個(gè)對(duì)數(shù)單位。前提是蛋白質(zhì)使用適當(dāng)?shù)拿笣舛冗M(jìn)行標(biāo)記,這種動(dòng)態(tài)范圍對(duì)于許多臨床應(yīng)用來(lái)說(shuō)是足夠的 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè);芯棄疾數(shù)字ELISA
芯棄疾JX-8B單分子普惠化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,超敏檢測(cè),理論可達(dá)飛克級(jí);單分子技術(shù)數(shù)字ELISA高速檢測(cè)
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA 具有超敏的優(yōu)勢(shì):
超敏:芯棄疾.數(shù)字ELISA,與Simoa同樣的檢測(cè)方案,將檢測(cè)結(jié)果二維化,使用成像方式,可精確量檢測(cè)區(qū)多少個(gè)微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng),具有陽(yáng)性熒光信號(hào),理論可達(dá)fg級(jí);使用常規(guī)ELISA試劑,測(cè)試IL-6等演示指標(biāo),也可輕松達(dá)到亞pg級(jí)(0.2-0.5pg/mL);使用顯微圖像處理方法,得到數(shù)萬(wàn)個(gè)磁珠中,陽(yáng)性的個(gè)數(shù)和亮度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到待測(cè)指標(biāo)的濃度。極低濃度時(shí),檢測(cè)信息為數(shù)字化信號(hào),有效提高檢測(cè)靈敏度到0.2 pg/ml級(jí); 單分子技術(shù)數(shù)字ELISA高速檢測(cè)