芯棄疾JX-8B數字ELISA產品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學和抑制作用。我們的目標是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標記的單個蛋白質分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復合物,結合的復合物用酶標記,如同常規的基于微球的ELISA。當測定含有極低濃度蛋白質的樣品,蛋白質的比值分子(以及由此產生的酶標記復合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標記免疫復合物的微球百分比遵循泊松分布,導致單個微球上存在單一免疫復合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質中捕獲并標記了50μM的蛋白質,并且在200,000個微球上進行標記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數量的酶使用標準檢測技術(例如,平板閱讀器)的標簽,因為熒光染料由每種酶生成的產物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數十萬種酶標簽才能產生高于該水平的熒光信號背景。多指標檢測 POCT 芯片采用單分子捕獲技術,15-20 分鐘出結果,靈敏度達 pg/ml 級別。飛克級數字ELISA試劑盒
抗體配對篩選的成本與效率優化,抗體篩選芯片通過高密度檢測區設計與微量樣本技術,大幅降低抗體開發的時間與物料成本。傳統方法中,49種抗體配對需多次實驗,耗時數天且消耗數百微升樣本;而芯片技術*需1小時、5μl樣本即可完成初步篩選,成本降低70%以上。其單通道多指標并行檢測能力,支持不同反應條件(如pH、溫度)的同步測試,快速篩選出比較好配對組合。在**標志物抗體開發中,該芯片可同時評估親和力、特異性與交叉反應性,加速診斷試劑盒的研發進程,尤其適合初創企業與科研機構的高效篩選需求,推動抗體工程從試錯性實驗向精細化篩選轉型。數字ELISA芯片POCT 芯片靈敏度媲美化學發光技術,可檢測超敏肌鈣蛋白 T 等關鍵急診標志物。
芯棄疾JX-8B數字ELISA產品
每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測
為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數字ELISA檢測血液中的蛋白質,對接受治理性前列腺切除術(RP)的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標志物病癥既用作篩查工具,也用于監測住院患者的復發接受治理性前列腺切除術28。治理性前列腺切除術后,絕大多數PSA被消除,水平低于標準商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監測這些患者的PSA恢復情況可以檢測前列腺病的復發,但術后幾年內生化復發可能不會被發現。
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由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區分“開啟”和“關閉”孔變得具有挑戰性,我們達到了數字動態范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數字線性動態范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數單位。前提是蛋白質使用適當的酶濃度進行標記,這種動態范圍對于許多臨床應用來說是足夠的 自動版數字 ELISA 芯片配套全自動加樣儀與掃描儀,單個芯片支持≥8 樣本同時反應,總時長 30 分鐘。
創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。循環血液轉化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發能夠測量這些蛋白質濃度的方法集中在蛋白質上的核酸標記復制,11,12或測量整體、結合標記蛋白分子的性質13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物,已將蛋白質的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平;更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而,檢測蛋白質仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(PCR),從而限制了蛋白質組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質s1,2提供了一種有希望的方法。芯棄疾單分子ELISA檢測盒,微量極速檢測,微量檢測15min就完成檢測!高科技數字ELISA使用靈活
POCT 芯片搭配小型化設備,即時檢測 hs-cTnT 等指標,為急診救治提供快速數據支持。飛克級數字ELISA試劑盒
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在前列腺切除術后患者中,能夠準確量化PSA水平的能力,即使在非常低的濃度(<300fM或10pg/mL)下,也應提供如果PSA水平升高,早期提示復發17,29。圖4顯示PSA水平使用數字ELISA在30名接受治理性前列腺切除術且術后至少6周采集血液的患者血清中進行測量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商業檢測限采用PSA數字ELISA(圖3A)對全血清樣本進行稀釋1:4后測定,成功檢測到所有30例患者中PSA,濃度范圍為14fg/mL至9.4pg/mL,平均濃度為1.5pg/mL。需要進一步的臨床研究來確定在RP患者中測量PSAfg/mL水平的診斷益處。 飛克級數字ELISA試劑盒