前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規方法。這一部分包括了非常專業化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內容。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數，鞭打頻率（BCF）?：精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。北京前向運動精子分析重復性高

CASA系統也可用于精子形態學評估。CASA系統可用來定量分析精子頭部形態學、中段甚至主段的形態，可以把精子頭部和中段分類為正?；蛘卟徽＃€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數、標準差和中位數，以及對染色的精子頂體區進行測量[3]。

與人工操作相比，自動化系統更具客觀性，精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5]，這優于有經驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經提示在CASA結果與生育力之間存在***聯系。Coetzee等發現自動分析的正常精子形態的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發現**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態特征的精子所占的百分比（Z%），和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續的，而且沒有顯示臨界值；高于臨界值，妊娠率也不會進一步增加[7]。 廣州魚精子分析ALHHamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。

人類精子冷凍保存和儲存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內容，更具可操作性。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲存；對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序；所有儲罐都應有液位監控報警系統，以監測溫度和液氮液位，傳感器應連接警報器，可通過實驗室人員的終端進行提醒。新證據表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統，不需要無菌的液氮。

方法:使用兩種已知濃度的質控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數精液的結果。結果:計數乳膠珠時,CellVU計數池的結果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數池和Makler計數池結果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統結果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數精液時,CellVU計數池與CASA系統結果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數池和Makler計數池結果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數池、CASA系統與血細胞計數池、Makler計數池結果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結論:計數精液時,CASA系統與CellVU計數結果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數方法。全自動精子分析儀在臨床Z療中展現了明顯的優勢。

Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對分析

根據質量控制的要求,對新精子分析系統進行性能驗證后,應與舊系統進行一致性評價,從而保證檢測結果的準確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ為實驗儀器,對精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)進行分析比對。結果:兩臺儀器的方法內和方法間離群值檢驗、偏倚圖和散點圖的線性關系和離群值檢測所有參數均能符合比對要求,檢測結果具有相關性;對實驗儀器的檢測結果適合范圍的檢驗,當其精子濃度r=0.988,前向運動精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預期偏倚(Bc)的接受性評價表明當精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當前向運動精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實驗儀器經比對分析顯示符合質控要求。結論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統的主要參數(精子濃度、前向運動精子百分率、總活力)結果具有可比性,檢測結果一致,可同時用于臨床標本的檢測。 精子分析儀節省時間，提高實驗室的工作效率，讓醫生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。香港兔子精子分析高準確率

Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩定性，能夠長時間穩定運行，保證數據的準確性和可重復性。北京前向運動精子分析重復性高

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426?！九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。北京前向運動精子分析重復性高