CASA系統進行**分析應注意以下幾點：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對比度閾值：由于分析儀是根據灰度的高低來判斷精子的真偽，對亮度和對比度要求特別高，檢測時應多次試用，尋找能準確識別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測定精子濃度準確性受**中細胞成份和非精子的顆粒物質的干擾，測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質的影響[9]，這些也是需要注意的。對于系統誤認為精子的非精子成分，如精原細胞、白細胞和非白細胞顆粒等，可人為準確記數后在可刪除雜質一欄將其舍去。3.3出現1次異常結果應間隔復查反復檢查2?3次方能得出比較正確的結果。3.4對于無精子的患者應仔細進行視野檢查注意不要將雜質誤認為精子計數在內，應將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認無精后再出報告。CASA系統操作簡便，檢測速度快，且重復性優于人工檢測。北京前向運動精子分析DAP

精子計數是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數量將精子計數值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數板上，在顯微鏡下計數紅細胞計數區內的所有精子數并換算為每m1內所含精子數。此外還可用電子細胞計數儀經調整閾值設置后計數精子數量。將已經液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數板內，計數二大格（每格面積1平方毫米）之精子數，在尾數后加5個“0”即得每毫升精液內精子數。例如計數為1280個，則每毫升精子應為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內，稀釋后進行計數。如精子的數目極少，亦可改為稀釋10倍計數。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數來反映睪丸的生精機能。南京牛精子分析精子分析儀節省時間，提高實驗室的工作效率，讓醫生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。

男科實驗室中通常所指的質量包含三個方面：實驗室內部質量、醫生處置的質量以及結果的質量［3］。1．實驗室內部質量與**分析有關的實驗室內部質量主要是工作人員的素質和所采用儀器的質量。工作人員應經過特殊的培訓?儀器必須處于正常狀態、確保準確的結果?操作應符合規程［4］。CASA系統本身的質量難于評定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機和計算機經檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密；因此?有關軟件的數學上、信息性的、統計學的或生物測量方面的檢查實驗室難于進行。

美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經被FDA和國內外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數板在大鼠附睪精子計數結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養液進行一定倍數的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數,同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數板內,通過光學顯微鏡進行計數,比較兩種計數方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數器的精子計數結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數板的精子計數結果無統計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩定性，能夠長時間穩定運行，保證數據的準確性和可重復性。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規方法。這一部分包括了非常專業化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內容。WHO第6版明確提出：使用CASA系統須遵循適當的程序步驟，才能獲得可靠和可重復的結果。上海牛精子分析VSL

CASA系統用量少，檢測速度快，能夠顯著提高實驗室的工作效率。北京前向運動精子分析DAP

精子手工計數原理及操作方法1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/ml北京前向運動精子分析DAP