精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓(xùn),了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等,使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]:開機接通電源,打開計算機輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,置顯微鏡操作平臺上,點擊“活動顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單,系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài),圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結(jié)束后,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。廣州計數(shù)精子分析負相差
CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高,檢測時應(yīng)多次試用,尋找能準確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準確性受**中細胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認為精子的非精子成分,如精原細胞、白細胞和非白細胞顆粒等,可人為準確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細進行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認為精子計數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認無精后再出報告。上海瀕危物種精子分析W.H.O 4CASA系統(tǒng)通過計算機分析精子運動參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測方法。
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%;凝集精子:<10%;未成熟精細胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時已進入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時,精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細胞。八、精液細胞檢查[正常參考值]白細胞(WBC):<5個/HP(高倍鏡視野);紅細胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細胞,對生殖系*有診斷意義。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點。
二、生化及免疫學(xué)檢驗:5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)。現(xiàn)認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性。【臨床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動,干擾精子的運行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時,系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。計算機輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。香港前向運動精子分析負相差
CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響,提高了檢測的客觀性和可重復(fù)性?。廣州計數(shù)精子分析負相差
CASA,即計算機輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進行精確評估的方法。WHO第五版指南強調(diào),相比人工檢測,CASA提供更準確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運動和超活化運動,以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析。但要確保可靠結(jié)果,操作者需注意標本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進行兩次分析,每次至少200個精子,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性。廣州計數(shù)精子分析負相差