HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟冰凍組織切片的HE染色。云南靠譜的HE染色報告
HE染色在**染色中的應用,小細胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,生長迅速,轉移較早,五年存活率*為1%-2%,預后非常差。其小細胞肺***細胞HE染色的特征,主要表現為組織結構,包括巢狀、小梁狀、實性片狀,常有菊形團形成,*巢周圍的瘤細胞呈柵欄狀排列,*細胞較小,一般小于三個靜止的淋巴細胞,呈圓形、卵圓形或短梭形,胞質稀少,胞界不清,核染色質呈細顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,核分裂象每十個高倍視野大于十一個,常見大片狀壞死。天津專業的HE染色關于HE染色,常用的結果分析原理。
HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。實驗過程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,分化液分化,自來水洗,返藍液返藍,流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結果判讀:細胞核呈藍色,細胞質呈紅色
HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,固定過久,導致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時就會出現染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。HE染色,優先南京英瀚斯生物。
HE染色法的話,不能準確說出細胞器的顏色,實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。或者詳細說明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎染色方法。遼寧靠譜的HE染色報告
脾臟組織HE染色如何觀察。云南靠譜的HE染色報告
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,促進伊紅與胞漿蛋白質結合,其本身不參與染色的反應。當蘇木素染色效能極高,很短時間就導致核漿共染時,可適當地添加冰醋酸(一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現在有商用的HE染色液賣,但是質量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產生氧化膜和結晶,這也是提示更換蘇木素的標志之一)。云南靠譜的HE染色報告