HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,透明潔凈,封裱美觀。HE染色切片知識(shí)以及如何做出漂亮的切片。江西值得信賴的HE染色公司
HE染色不管怎么操作,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對(duì)于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補(bǔ)充染色媒介,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。質(zhì)量好的HE染色哪家好HE染色,南京英瀚斯,專業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包公司。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,但動(dòng)物如豬或小鼠,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞。20倍物鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,細(xì)胞核大而圓,居中,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時(shí),胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),等等,但是在光鏡下是無法看到的,需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,還有膽小管、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),但是在HE染色時(shí)并不容易觀察到。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無增大、肝小葉形態(tài)是否完整,以檢測(cè)藥物等刺激因素對(duì)肝臟的損傷作用。
HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結(jié)構(gòu)對(duì)不同染料的結(jié)合程度不同,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核,Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),染色優(yōu)良的片子可以幫助我們?cè)陲@微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟關(guān)于HE染色,常用的結(jié)果分析原理。
HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細(xì)胞的,并不是直接通過顏色來區(qū)分的蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色.炎性細(xì)胞一類人體內(nèi)的免疫細(xì)胞,包括中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞.淋巴細(xì)胞是**容易和其它幾種細(xì)胞區(qū)分的,細(xì)胞小而圓,核漿比很大,核濃染成深藍(lán)紫色.漿細(xì)胞大小介于淋巴細(xì)胞和巨噬/多核/巨細(xì)胞之間,胞漿略嗜堿,核偏位,核染色深,高倍鏡下可見核呈車輪狀.多核細(xì)胞和巨細(xì)胞的概念是不是有點(diǎn)重疊,多核細(xì)胞故名思意是有多個(gè)核的大型細(xì)胞,如朗漢氏巨細(xì)胞,常在肺結(jié)核的干酪樣壞死灶周圍出現(xiàn),多個(gè)核排成一圈,異物巨細(xì)胞也是有許多個(gè)核的體積巨大的細(xì)胞,這兩種巨細(xì)胞胞質(zhì)都偏酸.巨噬細(xì)胞似乎在不同的組織中有不同的名稱.專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái),南京英瀚斯生物。結(jié)果客觀的HE染色公司
HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟。江西值得信賴的HE染色公司
HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長。江西值得信賴的HE染色公司