免疫組化的發展路程？在臨床病理診斷中，免疫組織化學(IHC)是一種很重要的技術和手段，從20世紀70年代開始，免疫組化技術就應用于病理診斷，對于診斷cancer、cancer分類、判斷預后產生了巨大的影響，同時也擴展了人們對于各種疾病及cancer形成過程的認識，提高了病理診斷與研究水平。但是，隨著免疫組化的廣泛應用，發現免疫組化技術存在一些局限性。深入研究免疫組化原理和技術，必須熟悉各種抗體真陽性反應部位，實現實驗室間免疫組化標準化，使免疫組化在病理診斷中發揮比較大的輔助作用。如果您有免疫組化相關的實驗，可以與我們英瀚斯生物進行聯系。哪里可以做免疫組化？湖南組織免疫組化注意事項

英瀚斯生物為您整理免疫組化實驗步驟

1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h，脫蠟至水，用PBS沖洗三次，每次5min。

2、切片置于EDTA緩沖液中微波修復，中火至沸后斷電，間隔10min低火至沸。

3、自然冷卻后PBS洗3次，每次5min。4、切片放入3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10min，以阻斷內源性過氧化物酶。

5、PBS洗3次，每次5min，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）。

6、去除BSA液，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織，4℃過夜。

7、PBS洗3次，每次5min。

8、去除PBS液，每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗，4℃孵育50min。

9、PBS洗3次，每次5min。

10、去除PBS液，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液，顯微鏡控制顯色。

11、顯色完全后，蒸餾水或自來水沖洗，蘇木素復染，1%鹽酸酒精分化（1s），自來水沖洗，氨水返藍，流水沖洗。

12、切片經過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度，脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。 江蘇做得好的免疫組化要多少錢免疫組化IHC詳細介紹！

免疫組化原理及實驗步驟——實驗外包。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半抗原去免疫實驗動物，制備特異性抗體，再用這種抗體（第1抗體）作為抗原去免疫動物制備第二抗體，并用某種酶（常用辣根過氧化物酶）或生物素等處理后再與前述抗原成分結合，形成抗原 - 一抗 - 二抗復合物，將抗原放大，由于抗體與抗原結合后形成的免疫復合物是無色的，因此，還必須借助于組織化學方法將抗原抗體反應部位顯示出來。通過抗原抗體反應及呈色反應，顯示細胞或組織中的化學成分，在顯微鏡下可清晰看見細胞內發生的抗原抗體反應產物，從而能夠在細胞或組織原位確定某些化學成分的分布、含量。

免疫組化臨床應用中，可以對傳染性疾病診斷。應用抗病毒、細菌、zhen菌和寄生蟲抗原的特異性抗體進行免疫組化染色，可以檢測和診斷許多傳染性疾病病原微生物，如乙型肝炎病毒(HBV)、巨細胞病毒(CMV)、人乳T狀瘤病毒(HPV)、皰疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、細小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒(SARS)等等，由于免疫組化在傳染性疾病診斷中具有及時性、低風險性、高敏感性、特異性、有效性等特點，可以用于(1)用于人類新病原微生物的識別;(2)提供快速的形態學診斷，使嚴重傳染性疾病得以早期醫療;(3)在無法取得新鮮組織或尚無培養方法的情況下，提供診斷并對發病機制進行研究和認識。英瀚斯生物專業做實驗外包服務，一站式醫學科研平臺。做好免疫組化，你需要了解這些！

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫生對其染色結果的判斷，進而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關重要，它需要病理醫生與病理技師兩者間的相互協調，密切配合和共同努力，病理醫生選擇抗體，設置對照，判讀結果，指導技術;而技術人員進行實驗操作，保證染色質量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環節，每一環節的失誤都可能影響檢測結果，如抗原保存，蛋白酶消化，增強技術及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質量的免疫組織化學切片是多方面相互配合的結果。英瀚斯實驗外包，病理染色切片免疫組化，效率高！江蘇做得好的免疫組化要多少錢

做免疫組化的目的是什么？湖南組織免疫組化注意事項

免疫組化應該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫著兩者都可，那就都能做。

（3）石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。

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