HE染色是目前國(guó)內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞，可直接影響疾病診斷的及時(shí)與準(zhǔn)確性。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片，是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后，嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SOP程序進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片，在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況，對(duì)切片中基本病理改變?nèi)绯溲⒂傺⒊鲅⑺[、變性、壞死、增生、纖維化、機(jī)化、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述，并反映出片子之間的差異。對(duì)典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識(shí)。HE染色，一站式實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)平臺(tái)。四川質(zhì)量好的HE染色分析

HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理，樣品處理：a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。四川質(zhì)量好的HE染色分析HE染色技術(shù)幾種常見(jiàn)的染色問(wèn)題。

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：Q3：細(xì)胞核染色過(guò)淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過(guò)短，或蘇木素過(guò)度氧化失效，或分化時(shí)間太長(zhǎng)。對(duì)策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個(gè)3-5min即可，接著重新染色。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來(lái)水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來(lái)水沖洗10min染色。Q4：細(xì)胞核染色過(guò)深，胞漿著藍(lán)色答：切片在蘇木素染液中停留過(guò)長(zhǎng)；或切片太厚；或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶，經(jīng)過(guò)固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全，則切片容易撕開(kāi)或碎裂，損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過(guò)程，稱為脫鈣。骨組織固定24小時(shí)后，鋸下不超過(guò)0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，進(jìn)行脫鈣。骨組織過(guò)厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間，但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。冰凍切片是否可以做HE染色？

HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。去氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合使胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對(duì)比。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對(duì)蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán)，如處理適宜，可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來(lái)。HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。四川質(zhì)量好的HE染色分析

HE染色結(jié)果如何分析和讀片？四川質(zhì)量好的HE染色分析

HE 染色是病理的主要常規(guī)染色，其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異，組織結(jié)構(gòu)對(duì)不同染料的結(jié)合程度不同，我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核，Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì)，染色優(yōu)良的片子可以幫助我們?cè)陲@微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調(diào)整，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟四川質(zhì)量好的HE染色分析