Amicon? Pro純化超濾管簡(jiǎn)明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含65分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點(diǎn)您了解嗎?徐匯區(qū)默克2ml超濾濃縮管規(guī)格
無(wú)血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細(xì)胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據(jù)樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標(biāo)外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來(lái)選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達(dá)到更好的得率和操作體驗(yàn)。 樣品體積大于 30mL 時(shí)可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請(qǐng)注意攪拌式超濾杯在200mL 以內(nèi)時(shí)吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進(jìn)一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應(yīng)抗體的磁珠進(jìn)行親和純化精制。無(wú)錫默克超濾濃縮管上海超濾濃縮管銷售公司電話多少?
離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時(shí)樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時(shí),原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時(shí)很多樣而復(fù)雜,過(guò)濾的過(guò)程中很重要的一點(diǎn)是操作過(guò)程不應(yīng)給樣品帶來(lái)新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請(qǐng)參考產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)或垂詢技術(shù)支持專線 。回收率及其重要性超濾的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會(huì)對(duì)這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量
基于 Millipore? 先進(jìn)的膜過(guò)濾技術(shù),默克密理博開(kāi)發(fā)了獨(dú)特的腺***及慢***純化與濃縮試劑盒。試劑盒中已經(jīng)包括了必需的 Steriflip? 過(guò)濾裝置和超濾管,能在短短 2 小時(shí)內(nèi)安全、快捷地獲得高產(chǎn)***。 節(jié)約時(shí)間:整個(gè)操作需 2 小時(shí)。 產(chǎn)量高:***回收率超過(guò) 70%。 整體體驗(yàn)極好:流程簡(jiǎn)便而***質(zhì)量高。 設(shè)計(jì)新穎易操作:Steriflip? 過(guò)濾裝置可以替代昂貴的設(shè)備,使原本繁瑣凌亂的操作變得簡(jiǎn)單而標(biāo)準(zhǔn)。 安全:封閉的真空抽濾設(shè)計(jì),完全避免樣品飛濺造 成的***污染和損失。超濾濃縮管的好處有很多。
蛋白復(fù)性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過(guò)度濃縮時(shí)發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對(duì)樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設(shè)計(jì)的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時(shí)內(nèi)即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn): 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質(zhì),增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會(huì)像使用夾子或打結(jié)那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設(shè)計(jì),易于打開(kāi)和關(guān)緊 硬管設(shè)計(jì),易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級(jí)樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標(biāo)準(zhǔn)***頭加樣,而非注射器和針頭加樣,減少膜破損的風(fēng)險(xiǎn)提供的浮漂適合在常見(jiàn)的廣口燒杯中使用,方便在透析過(guò)程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品益啟生物公司的超濾濃縮管系列有很多。無(wú)錫默克超濾濃縮管
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多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對(duì)在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液徐匯區(qū)默克2ml超濾濃縮管規(guī)格
上海益啟生物科技有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來(lái)、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來(lái)的道路上大放光明,攜手共畫(huà)藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的化工行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來(lái)公司能成為行業(yè)的翹楚,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將引領(lǐng)益啟供和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來(lái),公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來(lái)贏得市場(chǎng),我們一直在路上!