加入漂洗緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的5倍)與樹(shù)脂混勻并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請(qǐng)使用目錄號(hào)ACS500024。益啟生物公司的超濾濃縮管種類(lèi)繁多。常州默克離心濃縮管咨詢(xún)問(wèn)價(jià)
Minicon?濃縮器 Minicon? 濃縮器用于在電泳或免疫電泳分析前對(duì)尿液和腦脊液進(jìn)行濃縮,以增強(qiáng)對(duì)不正常或病態(tài)的蛋白質(zhì)(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的識(shí)別。B15型有 8 個(gè)濃縮單元,用于 5mL 樣本的處理;CS15型有 10 個(gè)濃縮單元,適合 2.5mL 樣品的處理。溶劑和鹽分通過(guò)超濾被吸收劑吸收而樣品被濃縮。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 靜態(tài)濃縮器,不需要其它輔助裝置 濃縮倍數(shù)達(dá)到 100 倍,樣品終體積小 同時(shí)濃縮多個(gè)臨床樣品 特別推薦用于尿液、腦脊液等的蛋白 富集分析松江區(qū)默克4ml超濾濃縮管咨詢(xún)問(wèn)價(jià)上海Millipore超濾濃縮管授權(quán)代理商!
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *
加入漂洗緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹(shù)脂柱床體積的5倍)與樹(shù)脂混勻并離心。< 500μL樹(shù)脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹(shù)脂時(shí)2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請(qǐng)使用目錄號(hào)ACS500024。根據(jù)您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設(shè)計(jì)。
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋?zhuān)cprotein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來(lái)對(duì)外泌體的干擾),請(qǐng)參考默克磁珠操作說(shuō)明書(shū)。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的工具解決外泌體制備的高大上問(wèn)題,真是惠而不費(fèi),不亦樂(lè)乎?超濾濃縮管應(yīng)用領(lǐng)域你知道嗎。常州默克4ml超濾濃縮管報(bào)價(jià)
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通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過(guò)程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時(shí) 會(huì)降低回收率。選擇膜和裝置時(shí)需要同時(shí)考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進(jìn)行超濾時(shí),流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái),甚 至可能隨著壓力的增加而降低。常州默克離心濃縮管咨詢(xún)問(wèn)價(jià)
上海益啟生物科技有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才,集企業(yè)奇思,創(chuàng)經(jīng)濟(jì)奇跡,一群有夢(mèng)想有朝氣的團(tuán)隊(duì)不斷在前進(jìn)的道路上開(kāi)創(chuàng)新天地,繪畫(huà)新藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的化工中始終保持良好的信譽(yù),信奉著“爭(zhēng)取每一個(gè)客戶(hù)不容易,失去每一個(gè)用戶(hù)很簡(jiǎn)單”的理念,市場(chǎng)是企業(yè)的方向,質(zhì)量是企業(yè)的生命,在公司有效方針的領(lǐng)導(dǎo)下,全體上下,團(tuán)結(jié)一致,共同進(jìn)退,齊心協(xié)力把各方面工作做得更好,努力開(kāi)創(chuàng)工作的新局面,公司的新高度,未來(lái)益啟供和您一起奔向更美好的未來(lái),即使現(xiàn)在有一點(diǎn)小小的成績(jī),也不足以驕傲,過(guò)去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗(yàn),才能繼續(xù)上路,讓我們一起點(diǎn)燃新的希望,放飛新的夢(mèng)想!