加入漂洗緩沖液（體積是樹脂柱床體積的7.5倍）并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液（體積是樹脂柱床體積的5倍）與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min；≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體，在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時，可以延長結(jié)合反應(yīng)時間，并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾、濃縮、除鹽！金山區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)

外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *金山區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)超濾濃縮管的系列有很多種。

7次低速離心，總耗時~100分鐘（含60分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。

雖然影響因素較多，我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時節(jié)省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級，有時也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時，孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多，我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時節(jié)省過濾時間。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。

Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計使蛋白樣品，特別是小體積樣品回收，避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤； 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計為反轉(zhuǎn)回收模式樣品吸附損失小； 合理的死體積設(shè)計，避免樣品離干而降低回收率； 能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化，并滿足下游各種應(yīng)用的要求，使研究者處理樣品時倍感輕松。 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 設(shè)計精巧、緊湊，一體化結(jié)構(gòu)確保不會發(fā)生滲漏，即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。 您了解超濾濃縮管的優(yōu)勢嗎？嘉定區(qū)離心濃縮管聯(lián)系電話

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創(chuàng)新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統(tǒng) Amicon? Pro 純化超濾系統(tǒng) 目前的蛋白純化常常包括很多步驟，用到多種器具，卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉(zhuǎn)移帶來的各種風(fēng)險，減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費(fèi)的時間，默克密理博的研發(fā)團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統(tǒng)。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標(biāo)準(zhǔn)化操作，使純化濃縮蛋白變得簡便高效，數(shù)據(jù)穩(wěn)定易得。 開放的設(shè)計使您可以根據(jù)實(shí)際需要靈活使用，Amicon?Pro將成為實(shí)驗(yàn)室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。金山區(qū)默克超濾濃縮管參數(shù)

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