如果能確保用同樣的超濾管對(duì)其它蛋白成功操作的話，那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性（構(gòu)象差異）而影響濃縮效果，建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管（如原本選用30k，此時(shí)可以選擇10k）。 2）如果目的樣本也不在濾過(guò)液中，那么： a）蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL？ b）用來(lái)確定樣本濃度的方法是什么？是否可信？ c）目的蛋白是不是沉淀了？如果是的，具體解決方法請(qǐng)參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問(wèn)題的解釋。超濾濃縮管的系列有很多。普陀區(qū)默克離心濃縮管批發(fā)

微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。Merck超濾濃縮管咨詢問(wèn)價(jià)上海超濾濃縮管代理銷售哪家好？

提供的超濾管是沒(méi)有經(jīng)過(guò)去內(nèi)***處理的，同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過(guò)程中是無(wú)法去除的。可在實(shí)驗(yàn)前通過(guò)先用0.5M NaOH預(yù)清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過(guò)的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng)，對(duì)于這種情況，可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過(guò)減小膜面積來(lái)降低非特異性吸附。

雖然影響因素較多，我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì)，表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí)，有時(shí)也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見，實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過(guò)的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí)，孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過(guò)率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對(duì)一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)，需要謹(jǐn)慎地選擇合適的 NMWL膜和設(shè)備。雖然影響因素較多，我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜，這樣可以比較大化樣品的回收，同時(shí)節(jié)省過(guò)濾時(shí)間。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。

這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應(yīng)用兼容，常常需要用透析或滲濾方法對(duì)蛋白樣品進(jìn)行緩沖液置換。傳統(tǒng)透析方法需要時(shí)間很長(zhǎng)，多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活，而且***還需要一步濃縮。新產(chǎn)品 Amicon? Pro 帶來(lái)了突破性的革新，需一步溫和的滲濾操作即可達(dá)到同時(shí)對(duì)樣品進(jìn)行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標(biāo)準(zhǔn) 操作步驟的優(yōu)化與簡(jiǎn)化往往帶來(lái)更好的結(jié)果，數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性、可比性和高通量化隨之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創(chuàng)造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體，減少樣品轉(zhuǎn)移損失和人為操作的繁瑣和誤差，使蛋白樣品的處理更加標(biāo)準(zhǔn)化，數(shù)據(jù)結(jié)果便于評(píng)估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。益啟生物公司主營(yíng)超濾濃縮管銷售。奉賢區(qū)默克離心濃縮管哪家優(yōu)惠

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