Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]購買超濾濃縮管就找益啟生物公司。南京Millipore超濾濃縮管訂購
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設計,一經推出即成為生物樣品操作的行業頭牌產品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物,抑或低濃度樣品或寶貴的活性樣品,Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 這款Amicon Ultra 15 mL離心式過濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優點: 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設計 2.避免樣品離干而降低回收率 3.便于估計和控制樣品濃縮倍數 4.重復性好,便于樣品數據相互比較青浦區默克超濾濃縮管商家上海超濾濃縮管銷售公司電話多少?
用超濾對分子進行分級 通過選定截留分子量的超濾操作能精確地將混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切實際。事實上,膜的規格描述是基于截留而非通過 的性質。一項實驗中,采用 100k NMWL 濾膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但這時比膜孔徑小的分子并不是完全自由地通過濾膜, 75kDa 的分子截留率為 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 種成分通過膜并不像單一成分的溶液那么簡單和容易。實 踐中,如果要分離兩種大分子,它們之間的分子量差異應該達到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 規格在兩種蛋白之間,則可達到比較理想的 分離。如果蛋白溶液較為稀釋,低壓下操作也有助于達到更好的效果。
核苷酸截留分子量(NCO) 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標定的,適合各種蛋白研究,但在核酸 和多糖純化時則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結構容易漏 過,相對于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更小)。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實質是溶質累積在膜表面造成的堵塞,產生除了膜本身截留分 子量以外的過濾限制。當溶質濃度較高時,會形成相當于第二層濾膜作 用的膠體層,干擾分子通過濾膜,同時降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會影響目的分子的狀態而使濃差極化現象加劇或減輕。超濾濃縮管的優缺點您知道嗎?
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結構緊密,確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *膜的常規截留分子量為5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直徑分為25,44.5,47,63.5和76mm。超濾濃縮管的好處有很多。青浦區默克超濾濃縮管商家
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***的化學兼容性 ?膜與管壁采用特別的熱封工藝,避免使用膠水 帶來的化學溶出對樣品的污染 ?Ultracel? 超濾膜和聚丙烯管材性能穩定,化學 兼容性好 ?pH3-10 適用 特別推薦應用(提供實驗報告作為參考) Amicon? Ultra 離心超濾管: ? 生物大分子樣品濃縮、脫鹽及緩沖液置換 ? 尿液中蛋白質的濃縮 ? 游離標記物的去除 ? 抗體的快速濃縮 ? 血清多肽生物標志物的純化 ? 雙向電泳蛋白樣品制備 ? 樣品去垢劑的去除 操作更安心 ?設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發生滲漏,即 使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作 ?性能穩定,數據平行性、重現性好,適合精細操作和 高通量操作南京Millipore超濾濃縮管訂購
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