將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內加入預先準備好的1.5 mL含有染料的反應混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優化選做：將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時濃縮。 8. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標記好的抗體。 特點與優點： 特別的反轉離心回收設計，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。松江區濃縮管參數

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾），請參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準，相較于需要昂貴的設備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費，不亦樂乎？默克離心濃縮管參數超濾濃縮管咨詢服務電話多少呢。

溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對于高濃度（達 百分之十）達分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時，向超濾裝置中導入氣壓，大于超濾膜截留分子量的溶質將被截留在容器內，水及小于超濾膜截留分子量的溶質（如鹽分）會被過濾并排出。加壓拌式設計防止濃縮的樣品發生沉淀，比離心超濾溫和，對于高濃度、易沉淀樣品的進一步濃縮同時脫鹽等應用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經處理后反復使用，更為經濟。

Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時~100分鐘（含65分鐘孵育時間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動促進結合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結合雜質。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細胞學或動物實驗前的無菌處理 已經經過上述方法制備的外泌體在進行細胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾，這個時候考慮到得率，應該采用離心法處理，以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時，可以適當延長離心時間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。上海超濾濃縮管代理銷售推薦益啟生物公司。松江區濃縮管參數

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特點與優點： 高產：沒有樣品轉移，損失更少 溫和：特別的滲濾設計使換液過程更溫和 快速：從細胞裂解到純化、優化一共需要5次低速離心 靈活：一種離心方法，***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的，常常需要摸索和優化。應該考慮為特定蛋白選擇相應的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法！ Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液松江區濃縮管參數

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