將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. Amicon?Pro上樣池內(nèi)加入預(yù)先準(zhǔn)備好的1.5 mL含有染料的反應(yīng)混合液。 4. 4,000×g離心15 min。 5. 優(yōu)化選做：將樣品在室溫下多孵育30 min。 6. 上樣池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g離心15 min換液同時(shí)濃縮。 8. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管1,000×g離心回收標(biāo)記好的抗體。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)，滯留體積很小，樣品損失少， 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干，保證樣品回收率和活性 超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。松江區(qū)濃縮管參數(shù)

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂乎？默克離心濃縮管參數(shù)超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。

溫和的高濃度樣品濃縮、脫鹽裝置 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾杯 Amicon? stirred cells 攪拌式超濾裝置對(duì)于高濃度（達(dá) 百分之十）達(dá)分子溶液快速濃縮和脫鹽提供了的可行方法。做蛋白濃縮時(shí)，向超濾裝置中導(dǎo)入氣壓，大于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)將被截留在容器內(nèi)，水及小于超濾膜截留分子量的溶質(zhì)（如鹽分）會(huì)被過濾并排出。加壓拌式設(shè)計(jì)防止?jié)饪s的樣品發(fā)生沉淀，比離心超濾溫和，對(duì)于高濃度、易沉淀樣品的進(jìn)一步濃縮同時(shí)脫鹽等應(yīng)用是比較好選擇。配套選擇的超濾膜可以滅菌并經(jīng)處理后反復(fù)使用，更為經(jīng)濟(jì)。

Amicon? Pro純化超濾管簡(jiǎn)明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag，His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體，適合～0.5 mL裂解液操作 6次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含65分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾，這個(gè)時(shí)候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]益啟生物公司的超濾濃縮管種類繁多。

脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。上海超濾濃縮管代理銷售推薦益啟生物公司。松江區(qū)濃縮管參數(shù)

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特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)： 高產(chǎn)：沒有樣品轉(zhuǎn)移，損失更少 溫和：特別的滲濾設(shè)計(jì)使換液過程更溫和 快速：從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活：一種離心方法，***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的，常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法！ Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液松江區(qū)濃縮管參數(shù)

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