糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上,主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結合,紅色,定位于胞漿上。3、應用隨著醫(yī)學實驗技術的發(fā)展,糖原染色應用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等~切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。湖南品質好的糖原染色試劑盒銷售廠家
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應特別引起注意湖南品質好的糖原染色試劑盒銷售廠家糖原累積病診斷和研究 ,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些的診斷等。
GUS染色步驟:1.將準備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時至過夜。2.葉片等綠色材料轉入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍色小點即為GUS表達位點。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當操作大的組織和樣品時,可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細胞。
糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應積分正常人幼紅細胞PAS反應積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細胞PAS反應多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞PAS反應積分可40甚至高達100--200以上用于不典型巨核細胞與李-斯細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性而后者反應為陰性或弱性~多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細胞、骨骼肌、心肌等處。
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x000c_10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍。11、逐級常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。本試劑盒適用于骨髓細胞涂片,血液細胞涂片。湖南品質好的糖原染色試劑盒銷售廠家
適用于教學和科研上的核染色質染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。湖南品質好的糖原染色試劑盒銷售廠家
染色的一般原則:1.熒光素產(chǎn)品一般為微量試劑,取用前請離心集液,以及避光保存和使用。建議您在收到產(chǎn)品之后,分裝為小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式細胞儀只可檢測單細胞懸液,如使用組織樣本,首先必須制備成單細胞懸液,細胞數(shù)量不應低于1X106/ml。3.推薦使用懸浮培養(yǎng)細胞。如果是貼壁細胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不當,可能引起假陽性,而用細胞刮子會造成細胞粘連成團,而影響檢測。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。湖南品質好的糖原染色試劑盒銷售廠家
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