染色的一般原則:因檢測細胞的類型、凋亡誘導劑種類、使用的檢測儀器不同,因而流式檢測的熒光補償也不同,因此建議每次檢測均需使用凋亡誘導處理的細胞做單陽對照,進行熒光補償的調節。標記抗體常用熒光素FITC,EGFP激發光:488nm發射光:525nm;使用面較廣,價格便宜。PE激發光488nm發射光575nm,此熒光的激發效率較佳,故此熒光得到的信號較強;檢測某些弱表達的抗原,推薦使用此熒光素。價格較FITC昂貴。APC激發光633nm,發射光660nm,在配有雙激光的流式細胞儀上,此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來避開自帶綠色熒光的樣本。流式細胞儀相關試劑盒。切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。北京如何使用糖原染色試劑盒
糖原D-PAS染色液:使用方法:1、兩張相同切片,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水。2、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,入水中1h作為對照。3、流水沖洗兩張切片各5~10min。4、入過碘酸溶液,室溫放置5~8min,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染10~20min。7、自來水沖洗10min。8、入Mayer蘇木素染色液,染細胞核1~2min。9、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s。10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗使其返藍。11、二甲苯透明,中性樹膠封固。浙江提供糖原染色試劑盒平均價格急性單核細胞白血病原、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經過碘酸氧化,產生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細胞增生性疾病,其淋巴細胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細胞良性增生時,淋巴細胞積分值正常。醫|學教育網搜集整理故該試驗可用于鑒別良性與惡性淋巴細胞增生性疾病。2.紅白血病時幼紅細胞的PAS染色呈強陽性反應,積分值增高;溶血性貧血及巨幼細胞性貧血時,幼紅細胞的PAS染色積分值在正常范圍內,故該試驗也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細胞增多的性質。3.急性粒細胞白血病時,原始及幼稚粒細胞PAS染色常呈陰性反應;急性淋巴細胞白血病時,原始及幼稚淋巴細胞常呈陽性反應;急性單核細胞白血病時,原始及幼稚單核細胞多呈強陽性反應。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別該依據切片厚薄、組織的類別等決定。
特殊染色方法選擇應遵循:1、特異性高、傳統或經典的染色方法;特異、傳統/經典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質。剛果紅染色作為經典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實用。淀粉樣物質(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對簡便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡便的方法,無論對于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節省時間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問題而影響染色結果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡單方便、省時,同時陽性著染對比度也很明顯。在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙。安徽糖原染色試劑盒廠家現貨
主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。北京如何使用糖原染色試劑盒
彈力染色應用:(1)動靜脈的辨認:在血管病變時是動脈還是靜脈以及是否為血管壁難辨認時,彈力纖維染色有助于辨認。有彈力板者為動脈,有彈力纖維構成血管輪廓者為血管。彈力纖維抗損傷能力較強,故彈力性纖維構成血管輪廓不易損壞。(2)彈力纖維瘤的診斷:彈力纖維染色可見瘤樣病變內有大量彈力纖維增生,非真性。(3)心血管先天性彈力組織增生,這組疾病有先天性內膜炎及冠狀動脈的彈力纖維組織增生。彈力纖維染色有助于診斷。(4)彈力纖維損傷性疾病:這組疾病有肺氣腫、、大動脈中層炎癥等,彈力纖維染色有助于這些疾病的觀察診斷北京如何使用糖原染色試劑盒