糖原染色:細(xì)胞內(nèi)含1,2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過碘酸氧化后產(chǎn)生醛基,與特殊染液作用,使無色品紅變成紅色化合物,沉淀于胞質(zhì)之中。紅色的深淺與細(xì)胞中起反應(yīng)的1,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細(xì)胞與李—斯細(xì)胞的鑒別,前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性,后者為陰性或弱陽性;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別,前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性,而后者反應(yīng)為陰性或弱性。正常值正常情況下,紅細(xì)胞系統(tǒng)的原、幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞;粒細(xì)胞系統(tǒng)的原粒細(xì)胞、原單核細(xì)胞和大多數(shù)淋巴細(xì)胞為陰性反應(yīng)。自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽性反應(yīng)。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒哪家便宜
糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽性而后者反應(yīng)為陰性或弱性安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕叮舫蓤F(tuán)或沒有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間。
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對(duì)疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置~一般厚度不超過3mm,大小不超過5×5m㎡。
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種。安徽哪家提供糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
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糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,否則影響染色效果。需使用一張陽性對(duì)照片驗(yàn)證酶的活性。2、過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)溫度以18~22℃較佳。3、試劑(A)、試劑(B)、試劑(C)、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,避光暗處使用。4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,其分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。5、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。6、況冶切片染色時(shí)間盡量要短。山東哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒哪家便宜