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湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應

來源: 發(fā)布時間:2022年10月29日

染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色。急性粒-單核細胞白血病該染色法在急性粒-單核細胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應的細胞,甚至少數(shù)病例在單個細胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應,因此酯酶雙染色反應在急性粒-單核細胞白血病的診斷上具有獨特價值。巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應

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粘液染色法:粘液一般有以下幾點特性:(1)對鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍色。(2)對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍有異染性。(3)遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。(4)溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種:1、P.A.S染色法:操作方法同前,結果;中性粘液性物質(zhì),某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色,核呈藍色。2、AB/P.A.S染色法:該種方法的特點是能同時顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法:(1)切片常規(guī)脫蠟入水。(2)3%醋酸液洗2分鐘,入1%阿利新蘭醋酸液(PH2.5)10-20分鐘。(3)蒸餾水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)蘇木素淡染2-3分鐘,水洗。(6)常規(guī)脫水、封片。湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應急性單核細胞白血病原、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應。

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糖原染色――檢查項目的注意細節(jié):其判斷標準隨細胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。

糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合,形成紫色化合物,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化。

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糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細胞增生的性質(zhì)鑒別紅細胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細胞PAS反應積分正常人幼紅細胞PAS反應積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細胞白血病時PAS積分升高巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時幼紅細胞PAS反應多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時幼紅細胞PAS反應積分可40甚至高達100--200以上用于不典型巨核細胞與李-斯細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性后者為陰性或弱陽性;用于高雪細胞和尼曼一匹克細胞的鑒別前者PAS反應為強陽性而后者反應為陰性或弱性可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應

操作簡單方便,1h內(nèi)即可完成反應。湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應

糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結晶應重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結果:糖原呈紅色,細胞核呈藍色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當量鹽酸至25℃時加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時溶液應為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。湖南提供糖原染色試劑盒廠家供應

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