糖原染色的原理與操作方法是什么：（1）原理：過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法，是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物，再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊，并隨即投入固定液。浙江正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蠟切片脫蠟至水。（2）0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液（過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用）。（3）蒸餾水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分鐘。（Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用）（5）流水沖洗10分鐘。（6）蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。（7）脫水、透明、封蓋。結(jié)果：糖原呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制：（1）0.5%過碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸（98.3ml比重1.16鹽酸，加入蒸餾水成1000ml）20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水，攪拌加熱沸騰，待冷卻至50℃過濾，加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處，兩天后溶液變桔黃色或草黃色，然后加入少量活性碳并震蕩、過濾，此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色，染色效果較差~浙江正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，否則影響染色效果。

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化，產(chǎn)生醛基，與雪夫（Schiff）試劑中無色品紅結(jié)合，形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫（PAS）反應(yīng)。（1）雪夫液配制：堿性品紅1g溶于200ml沸水中，冷卻60℃時(shí)過濾，加1mmol/L鹽酸20ml，再冷卻至25℃左右，加偏重亞硫酸鈉（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗處24h，無色即可放冰箱中保存，呈微紅色，則加活性炭1～2g，吸附過濾使成無色液體，放冰箱中保存。若溶液變紅，即不能再用。（2）10g/L過碘酸水溶液：過碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用，一般可用3個(gè)月，變黃則失效

糖原染色法：染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基，其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色，沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟：1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水，蒸餾水洗2min（細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）；2.滴加過碘酸溶液，氧化5min；3.蒸餾水洗10min；4.滴加Schiff試劑，侵染10-20min；5.傾去Schiff試劑，流水沖洗10min；6.滴加蘇木素染色液，染核1-2min；7.流水沖洗5min；8.酸性乙醇分化液分化。糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。

糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面：盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能較好地保存糖原，但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象，多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存，是針對糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能 白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定，以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。浙江正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買

操作簡單方便，1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。浙江正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買

粘液染色法：粘液一般有以下幾點(diǎn)特性：（1）對鹽基性染料有親合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。（2）對某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。（3）遇醋酸發(fā)生沉淀，胃粘蛋白則除外。（4）溶于弱堿溶液。常用的粘液染色有以下幾種：1、P．A．S染色法：操作方法同前，結(jié)果；中性粘液性物質(zhì)，某些酸性粘液物質(zhì)呈紅色，核呈藍(lán)色。2、AB/P.A.S染色法：該種方法的特點(diǎn)是能同時(shí)顯示出酸性和中性粘液物質(zhì)。操作方法：（1）切片常規(guī)脫蠟入水。（2）3%醋酸液洗2分鐘，入1%阿利新蘭醋酸液（PH2.5）10-20分鐘。（3）蒸餾水洗。（4）按P.A.S染色程序。（5）蘇木素淡染2-3分鐘，水洗。（6）常規(guī)脫水、封片浙江正規(guī)糖原染色試劑盒哪里買