微量樣本超多重檢測(cè)芯片:亞pg級(jí)靈敏度與高通量的協(xié)同創(chuàng)新,微量樣本超多重檢測(cè)芯片突破傳統(tǒng)技術(shù)限制,單通道**多設(shè)計(jì)21個(gè)檢測(cè)區(qū),單個(gè)芯片并聯(lián)8-16個(gè)**通道,檢測(cè)速度達(dá)288-336測(cè)試/小時(shí),性能媲美化學(xué)發(fā)光技術(shù),靈敏度達(dá)亞pg級(jí)別。其“省樣本、省耗材、省空間”優(yōu)勢(shì)***:5μl微量進(jìn)樣適配稀缺樣本,21項(xiàng)指標(biāo)共享一套耗材降低成本,桌面式掃描儀節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間。在**普查中,該芯片可同時(shí)篩查29種肺*標(biāo)記物,篩選特異性>80%的組合(如CEA、SA、CA242),提高早期診斷準(zhǔn)確性;在炎癥因子檢測(cè)中,對(duì)IL-1β、IL-6等低豐度細(xì)胞因子的檢測(cè)線性范圍寬泛,為疾病早期***篩查提供了高效解決方案,尤其適合大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查與個(gè)體化醫(yī)療中的多因子分析。單分子陣列化技術(shù)通過微米級(jí)結(jié)構(gòu)與二次流原理,穩(wěn)定捕獲磁珠,構(gòu)建 “芯片實(shí)驗(yàn)室” 模式。單分子蛋白數(shù)字ELISA使用效果
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。
光纖束購(gòu)自SchottNorthAmericaouthbri,非增強(qiáng)型光澤硅片購(gòu)自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁(yè)鹽酸、無水乙醇和分子生物學(xué)級(jí)別的吐溫-20均購(gòu)自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購(gòu)自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測(cè)試劑和重組人TNF-α均購(gòu)自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測(cè)試劑和純化的PSA購(gòu)自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標(biāo)準(zhǔn)方法將檢測(cè)試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購(gòu)自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購(gòu)自綜合DNA技術(shù)公司(Coralville,IA)。 微型數(shù)字ELISA檢測(cè)用時(shí)芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量多重檢測(cè),微量樣本就能同時(shí)測(cè)試4項(xiàng)指標(biāo);
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)
我們已經(jīng)開發(fā)了兩種臨床相關(guān)蛋白的檢測(cè)方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標(biāo)記物單體提供的靈敏度轉(zhuǎn)化為高靈敏度的檢測(cè)方法血液中的蛋白質(zhì)。兩種蛋白質(zhì)的數(shù)字ELISA如圖1所示。開發(fā)這些試驗(yàn)的關(guān)鍵參數(shù)是:珠子濃度和兩種標(biāo)記試劑(檢測(cè)試劑和酶偶聯(lián)物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個(gè)相互競(jìng)爭(zhēng)的因素。首先,足夠的珠子必須在場(chǎng)以從熱力學(xué)和動(dòng)力學(xué)中捕獲大部分目標(biāo)分析物從熱力學(xué)角度看,100μL中有20萬個(gè)珠子,每個(gè)珠子大約有8萬個(gè)與之結(jié)合的抗體25相當(dāng)于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導(dǎo)致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發(fā)表工作)。
單分子芯片技術(shù)原理與超敏檢測(cè)能力:芯棄疾單分子芯片基于數(shù)字ELISA技術(shù),采用微米級(jí)捕獲結(jié)構(gòu)與二次流原理,通過微流控設(shè)計(jì)在單個(gè)芯片上形成數(shù)十萬至百萬個(gè)**反應(yīng)單元。每個(gè)反應(yīng)單元由表面功能化的磁珠構(gòu)成,磁珠直徑約5微米,通過微孔陣列與流體動(dòng)力學(xué)優(yōu)化實(shí)現(xiàn)高密度、高穩(wěn)定性固定(捕獲效率>95%)。檢測(cè)過程中,靶標(biāo)分子與磁珠表面抗體結(jié)合后,采用量子點(diǎn)標(biāo)記的二抗進(jìn)行信號(hào)放大,通過高分辨率熒光顯微鏡(如20×物鏡)對(duì)每個(gè)磁珠的熒光強(qiáng)度進(jìn)行成像分析。其**突破在于單分子級(jí)信號(hào)分辨能力,例如IL-6檢測(cè)限低至0.2pg/mL(傳統(tǒng)ELISA為1-5pg/mL),靈敏度提升5-25倍。該技術(shù)通過全流程芯片集成(樣本裂解、反應(yīng)孵育、信號(hào)讀取),將試劑消耗量減少至傳統(tǒng)方法的1/10(*需5μL血清),并支持微量樣本(如10μL房水或淚液)中檢測(cè)神經(jīng)退行性疾病標(biāo)志物(如NfL濃度低至0.5pg/mL)。臨床研究表明,該芯片可在阿爾茨海默癥臨床癥狀出現(xiàn)前16年檢測(cè)到Aβ42異常聚集,為早期干預(yù)提供關(guān)鍵時(shí)間窗口。此外,芯片兼容自動(dòng)化操作系統(tǒng),單次檢測(cè)時(shí)間縮短至2小時(shí),較傳統(tǒng)數(shù)字ELISA效率提升3倍。芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,多重檢測(cè),同時(shí)測(cè)試2-6個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目;
單分子陣列化技術(shù):磁珠捕獲與信號(hào)放大的**支撐,單分子陣列化技術(shù)作為數(shù)字ELISA芯片的底層架構(gòu),通過微米級(jí)捕獲結(jié)構(gòu)與二次流原理,實(shí)現(xiàn)磁珠的高密度穩(wěn)定捕獲。在芯棄疾單分子芯片中,該技術(shù)使單個(gè)芯片承載數(shù)十萬磁珠,每個(gè)磁珠作為**反應(yīng)單元,***放大熒光信號(hào),降低背景噪聲。反應(yīng)后磁珠與量子點(diǎn)陣列的協(xié)同作用,進(jìn)一步提升檢測(cè)靈敏度,IL-6檢測(cè)中0.2pg/ml的低濃度樣本仍能呈現(xiàn)清晰的熒光信號(hào)梯度。該技術(shù)不僅確保了單分子級(jí)別的檢測(cè)精度,更通過陣列化設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)高通量并行反應(yīng),為低豐度蛋白的統(tǒng)計(jì)分析提供了充足的數(shù)據(jù)量,成為突破傳統(tǒng)ELISA檢測(cè)上限的關(guān)鍵技術(shù),支撐芯片在超敏檢測(cè)與多重分析中的優(yōu)異表現(xiàn)。芯棄疾芯片可檢測(cè)血清中 NfL 等較低豐度神經(jīng)因子,助力阿爾茨海默癥早期篩查。芯棄疾-勃望初芯數(shù)字ELISA特點(diǎn)
多指標(biāo)檢測(cè) POCT 芯片采用單分子捕獲技術(shù),15-20 分鐘出結(jié)果,靈敏度達(dá) pg/ml 級(jí)別。單分子蛋白數(shù)字ELISA使用效果
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品是什么?怎么做到單分子技術(shù)的低成本實(shí)現(xiàn)?參考原理:
分子水平的疾病檢測(cè)正在推動(dòng)早期診斷和治病的新興變革。該領(lǐng)域面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)是,用于早期診斷的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物可能存在于非常低的豐度中。傳統(tǒng)免疫分析技術(shù)的檢測(cè)下限為飛摩爾范圍(10?13M)。數(shù)字免疫分析技術(shù)將檢測(cè)靈敏度提高了三個(gè)數(shù)量級(jí),達(dá)到了飛摩爾范圍(10?16M)。這一能力有可能在診斷和治病領(lǐng)域開辟新的進(jìn)展,但這些技術(shù)已被限制為不適合高效常規(guī)使用的手動(dòng)程序。我們描述了一種新的實(shí)驗(yàn)室儀器,該儀器能夠完全自動(dòng)化單分子陣列(Simoa)技術(shù)進(jìn)行數(shù)字免疫分析。該儀器具有單分子靈敏度和多重檢測(cè),具有快速周轉(zhuǎn)時(shí)間和每小時(shí)處理66個(gè)樣本的能力。針對(duì)心血管、腫標(biāo)、傳染病、神經(jīng)學(xué)和炎癥研究中的16種感興趣的蛋白質(zhì),開發(fā)了單分子和多重?cái)?shù)字免疫分析方法。與傳統(tǒng)方法相比,Simoa免疫分析方法的平均靈敏度提高了lELISAwas>1200倍,變異系數(shù)為<10%。數(shù)字免疫分析在推進(jìn)人類診斷方面具有潛力,這在兩個(gè)臨床領(lǐng)域得到了體現(xiàn):創(chuàng)傷性腦損傷和傳染病的早期檢測(cè) 單分子蛋白數(shù)字ELISA使用效果