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科研數字ELISA檢測通量

來源: 發布時間:2025年04月25日

芯棄疾JX-8B數字ELISA產品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

我們已經開發了兩種臨床相關蛋白的檢測方法——前列腺特異性抗原(PSA)和腫瘤壞死因子α(TNF-α),以確定高酶標記物單體提供的靈敏度轉化為高靈敏度的檢測方法血液中的蛋白質。兩種蛋白質的數字ELISA如圖1所示。開發這些試驗的關鍵參數是:珠子濃度和兩種標記試劑(檢測試劑和酶偶聯物)的濃度。珠子濃度的選擇取決于幾個相互競爭的因素。首先,足夠的珠子必須在場以從熱力學和動力學中捕獲大部分目標分析物從熱力學角度看,100μL中有20萬個珠子,每個珠子大約有8萬個與之結合的抗體25相當于約0.3nM的抗體濃度,在該濃度下,抗體-蛋白平衡導致高捕獲效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未發表工作)。 數字化高敏ELISA芯片,可以進行8孔、4孔的靈活檢測。科研數字ELISA檢測通量

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

通過SiMoA對酶標記物進行數字檢測的線性動態范圍由區分“開啟”和“關閉”孔的能力決定。在酶與珠子的比例較低(小于約1:10)時,泊松統計表明,只有統計學上有效果的群體珠子是指含有零和一個酶的珠子。只要足夠多的珠子被檢測,單個酶就可以被檢測到,并且活性珠子的數量會超過泊松分布計數活性微球的噪聲。在酶與微球的高比率(大于約(1:10),活性珠子的比例變得更高,泊松統計表明有大量含有多種酶的微球。為了定量檢測到的酶的數量并保持含有多種酶的微球亞群中的線性對于酶,我們使用泊松統計法將活性珠子的數量轉換為檢測到的酶的數量 高科技數字ELISA購買靈活芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產品,超敏檢測,常規試劑可輕松達到0.2pg!

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創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA

我公司推出的數字化高靈敏ELISA芯片檢測產品應用場景:適合生物實驗室、醫學實驗室、科研市場、產品預研、產品開發、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應用場景應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。

我們繼續在兩個關鍵領域改進SiMoA技術。首先,在兩個關鍵領域可能再增加兩個靈敏度等級基于對酶標記的敏感性(圖2)可以檢測蛋白質,如果非特異性相互作用可以更小化背景信號。單個珠子上分離和詢問單個分子的能力為區分抗體-抗原結合事件和非特異性結合復合物。其次,我們簡化了檢測的物流。然而,即使在目前的形式下,我們相信數字ELISA有可能促進疾病的早期診斷和治理。

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根據目標蛋白的抗體制備了功能化的微球生產商說明。含有目標蛋白的100-μL測試溶液與200,000個磁珠懸浮液孵育2小時至23°C。然后將磁珠分離并用PBS和0.1%Tween-20洗滌三次。磁珠重新懸浮后與含有檢測抗體(通常約為1nM)的溶液孵育45分鐘。在23°C下最小值。然后將珠子分別用PBS和0.1%洗滌三次。Tween-20。將珠子與含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分鐘,然后分離并在PBSand0.1%Tween-20中洗滌六次。隨后將珠子重懸于10μLofPBS中,并加載到飛升液位陣列中。整個實驗的總時間約為~6小時。 7)數字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速進行微量樣本的檢測;

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芯棄疾JX-8B數字ELISA高敏檢測產品;具有以下特點:多重、超敏微量、極速靈活、開放; 
只有少量分泌蛋白可測量的可能性突顯了蛋白質測量領域面臨的挑戰:醫學上相關的生物標志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測定仍然是是蛋白質生物標志物敏感和特異性測量的基礎。然而,傳統的免疫分析技術在檢測不可測量的生物標志物時靈敏度不足,這些生物標志物肯定位于當前可檢測范圍之下。主流的傳統免疫分析方法——包括酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、化學發光和電化學發光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強信號檢測、電感耦合等離子體質譜,但這些方法的數據表明其成功有限。非常規方法如亞飛摩爾級檢測具有明顯的權衡,例如程序較長或無法提供定量答案。
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單分子的檢測原理:由Simoa數字免疫分析法實現的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之,類似免疫分析中的酶-底物反應是在相對較大的反應體積(50-100μL)中進行的,在信號生成步驟中稀釋了產物分子。信號分子的擴散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內。相比之下,Simoa通過將單獨標記的免疫復合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產物分子從酶-底物反應中的擴散。當單一酶標簽催化底物轉化為熒光產物時,產生的熒光團被限制在孔中,從而在短時間內產生可測量的熒光信號。科研數字ELISA檢測通量

標簽: 數字ELISA
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