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生物實驗室數字ELISA準確寬

來源: 發布時間:2025年01月06日

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我們繼續在兩個關鍵領域改進SiMoA技術。首先,在兩個關鍵領域可能再增加兩個靈敏度等級基于對酶標記的敏感性(圖2)可以檢測蛋白質,如果非特異性相互作用可以更小化背景信號。單個珠子上分離和詢問單個分子的能力為區分抗體-抗原結合事件和非特異性結合復合物。其次,我們簡化了檢測的物流。然而,即使在目前的形式下,我們相信數字ELISA有可能促進疾病的早期診斷和治理。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;生物實驗室數字ELISA準確寬

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參考原理:通過量化異常水平的生物標志物來檢測新生疾病過程是診斷和治干預的關鍵,以在出現繼發性臨床癥狀之前進行干預。蛋白質和核酸生物標志物的發現和驗證已成為生物制藥研究、靶向臨床研究設計以及早期疾病診斷追求的主要驅動力。1–4由于蛋白質生物標志物提供了比核酸更多的下游信息內容,因此它們可能作為臨床決策工具具有比較大的潛力。5據估計,人類蛋白質組來源于超過20,000個基因,且循環中有超過4000種分泌蛋白。6,7這些分泌蛋白中不到十分之一(375種)可以通過蛋白質測定技術可靠地測量。6在這些可測量的蛋白質中,幾乎有一半(171種)已由美國食品藥品監督管理局(FDA)批準的診斷測試,8個指出了蛋白質生物標志物對人類健康的重要性。陣列單分子數字ELISA價格芯棄疾JX-8B數字ELISA,極速檢測,快15min就能完成的單分子免疫檢測!

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    創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。循環血液轉化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發能夠測量這些蛋白質濃度的方法集中在蛋白質上的核酸標記復制,11,12或測量整體、結合標記蛋白分子的性質13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物,已將蛋白質的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平;更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而,檢測蛋白質仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(PCR),從而限制了蛋白質組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質s1,2提供了一種有希望的方法。

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將200,000個功能化DNA捕獲探針與100μL孵育含有目標DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小時后,移除DNA靶標溶液,用0.2×SSC緩沖液洗滌珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新懸浮并與10nM混合生物素標記的信號探針(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)對目標DNA具有特異性,孵育1小時。然后將珠子在去除信號探針后用含0.1%吐溫-20的0.2×SSC緩沖液洗滌三次。隨后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混勻并混合1小時。然后將珠子分離并在含0.1%吐溫-20的5×PBS緩沖液中洗滌六次。重懸于10μLofPBS中并加載到飛升微升孔陣列上。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產品,超敏檢測,常規試劑可輕松達到0.2pg!

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通過在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測單個免疫復合物,實現數字ELISA已使在亞細胞水平上測量血清中臨床重要的蛋白質成為可能飛摩爾濃度。我們認為,與之前報道的方法相比,數字ELISA表現出的不敏感性改善將轉化為診斷上的好處。例如,在本研究中測定的30個RP樣品中有9個樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標簽的先前比較高靈敏度PSA測定的LOD17。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,超敏檢測,理論可達飛克級;什么是數字ELISA產品

每個生物/醫學實驗室都用得起的單分子免疫檢測;生物實驗室數字ELISA準確寬

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

動力學上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質將在不到1min的時間內擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質分子的捕獲不會受到限制動力學上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應于泊松噪聲的可接受變異系數(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導致:a)非特異性結合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導致活性微球的比例過低,從而導致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 生物實驗室數字ELISA準確寬

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