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單分子陣列數字ELISA極速檢測

來源: 發布時間:2025年01月04日

芯棄疾JX-8B數字ELISA產品是什么?怎么做到單分子技術的低成本實現?參考原理:

分子水平的疾病檢測正在推動早期診斷和治病的新興變革。該領域面臨的一個挑戰是,用于早期診斷的蛋白質生物標志物可能存在于非常低的豐度中。傳統免疫分析技術的檢測下限為飛摩爾范圍(10?13M)。數字免疫分析技術將檢測靈敏度提高了三個數量級,達到了飛摩爾范圍(10?16M)。這一能力有可能在診斷和治病領域開辟新的進展,但這些技術已被限制為不適合高效常規使用的手動程序。我們描述了一種新的實驗室儀器,該儀器能夠完全自動化單分子陣列(Simoa)技術進行數字免疫分析。該儀器具有單分子靈敏度和多重檢測,具有快速周轉時間和每小時處理66個樣本的能力。針對心血管、腫標、傳染病、神經學和炎癥研究中的16種感興趣的蛋白質,開發了單分子和多重數字免疫分析方法。與傳統方法相比,Simoa免疫分析方法的平均靈敏度提高了lELISAwas>1200倍,變異系數為<10%。數字免疫分析在推進人類診斷方面具有潛力,這在兩個臨床領域得到了體現:創傷性腦損傷和傳染病的早期檢測 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產品,每個生物實驗室都能用的單分子檢測;單分子陣列數字ELISA極速檢測

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芯棄疾JX-8B數字ELISA產品

每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

單分子酶檢測到的比較低酶分子數假設蛋白質檢測分析的更終靈敏度為背景信號可能由非特異性相互作用產生。為了評估內在敏感性,我們通過將400,000個帶有生物素的珠子與不同濃度的酶綴合物鏈霉親和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,創建了具有明確酶與珠子比例的珠子群體。為了方便起見,生物素化珠子是通過將生物素化DNA與功能化的珠子雜交提供的。互補DNA。[我們注意到,該實驗不應被視為敏感的DNA檢測;該檢測的敏感性受到非特異性相互作用的限制,如補充圖2所示,這些相互作用發生在酶綴合物和表面結合的DNA之間。 哪些是數字ELISA檢測速度快5)數字化高敏ELISA芯片試劑盒,微量樣本可同時測2-4個指標;

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由于活性珠子的百分比接近50%(酶與微球的比例大于~1:1.5),然而,使用圖像分析軟件區分“開啟”和“關閉”孔變得具有挑戰性,我們達到了數字動態范圍的實際上限。例如,圖2中7fM(~45%活性)的信號偏離了線性。因此,這里使用50,000個孔展示的數字線性動態范圍是從3.5fM到350zM,即大約四個對數單位。前提是蛋白質使用適當的酶濃度進行標記,這種動態范圍對于許多臨床應用來說是足夠的

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數字ELISA檢測血液中的蛋白質,對接受治理性前列腺切除術(RP)的患者血清樣本中的PSA進行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標志物病癥既用作篩查工具,也用于監測住院患者的復發接受治理性前列腺切除術28。治理性前列腺切除術后,絕大多數PSA被消除,水平低于標準商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監測這些患者的PSA恢復情況可以檢測前列腺病的復發,但術后幾年內生化復發可能不會被發現。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,每個實驗室都能用的單分子檢測;

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數字ELISA測量蛋白質濃度遠低于傳統ELISA的能力源于兩種效應:1)SiMoA對酶標記的高度敏感性;以及2)通過數字化蛋白質檢測可以實現的低背景信號。任何免疫測定的靈敏度由其靈敏度決定。檢測技術到標簽,抗體親和力,試驗背景,以及背景測量值的變異(%CV)27.SiMoA對酶非常敏感標簽(圖2)為在數字ELISA中檢測亞飛摩爾濃度的標記蛋白提供了基礎。也就是說,對于給定親和力的抗體,其靈敏度為免疫測定將由測定背景決定,SiMoA的高標記靈敏度有助于降低這種背景。對照實驗表明,數字ELISA的背景來自于檢測抗體和酶的非特異性結合(NSB)與捕獲珠表面結合(補充表2)。AsSiMoA相比傳統檢測方法具有更高的標記靈敏度,明顯減少了檢測抗體(~1nM)和酶標記物(1–50pM)的需要,以檢測結合事件,與傳統方法相比(標記試劑濃度~10nM)。降低的標記物濃度減少了NSB到捕獲表面,從而導致背景信號明顯降低。 芯棄疾JX-8B數字ELISA,多重檢測,同時測試2-6個檢測項目;什么是數字ELISA極速

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先進新型的單分子檢測方法的普及版;每個生物/醫學實驗室都用得起的單分子免疫檢測;使用現有平臺就能做的單分子免疫檢測;

芯棄疾.數字ELISA-獨特創新技術方案:單分子芯片陣列化技術+POCT小型化:使用微米級捕獲結構+二次流原理,磁珠捕獲量更多(數十萬磁珠反應載體)、更穩定捕獲;絕大部分試劑反應遷移到芯片上,能真正實現“芯片實驗室”(LabonChip);

同樣的檢測方案,通過數十萬個磁珠陣列中,逐一檢測到每個陽性磁珠信號,得到高靈敏的檢測結果。 單分子陣列數字ELISA極速檢測

標簽: 數字ELISA
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