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醫療檢測用數字ELISA易用性

來源: 發布時間:2024年12月29日

    創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。蛋白質生物標志物在區分健康和疾病狀態方面的臨床應用,而監測疾病進展則需要測量復雜樣品中的低濃度蛋白質。目前的免疫測定方法測量的是蛋白質的濃度高于10?12M,6而大多數在病癥7、神經疾病8,9和接觸早期階段10中重要的蛋白質的濃度被認為在10?16到10?12M之間。需要提高靈敏度的例子包括:一個由一百萬個細胞組成的1毫米3疾病,每個細胞分泌5000種蛋白質到5升液體中。Simoa®由現任于哈佛大學醫學院的DavidWalt教授作為科學創始人于2007年創立。DavidWalt是美國的工程院,藝術院和醫學院三院院士。2010年,DavidWalt將Simoa®技術以封面文章的形式發表在《NatureBiotechnology》上,此技術開始為大眾所知并引起業界轟動。Simoa技術(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特點是通用陣列化檢測,實現超高的靈敏度,較傳統ELISA方法能夠高出3個數量級,達到飛克級別(fg/ml)甚至更低。已拿阿茲海默癥的兩個FDAbreakthroughdevice;通常用于各種科研方向:神經因子、蛋白組學、細胞因子等。 芯棄疾JX-8B簡易版單分子ELISA檢測產品,極速檢測,檢測步驟只需要3次操作,遠遠快于常規ELISA;醫療檢測用數字ELISA易用性

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每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測

動力學上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質將在不到1min的時間內擴散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質分子的捕獲不會受到限制動力學上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應于泊松噪聲的可接受變異系數(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導致:a)非特異性結合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導致活性微球的比例過低,從而導致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 單分子陣列數字ELISA靈敏度芯棄疾JX-8B數字ELISA,極速檢測,檢測用時只需要 15-30min!

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從TNF-α數字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補充圖3)。兩種方法的目標蛋白零濃度尖峰均為為這些實驗提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質的微摩爾濃度,在這些高蛋白質背景之上可以檢測到非常低濃度的目標蛋白。我們還開發了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數字分析方法,而無需復制目標


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芯棄疾JX-8B數字ELISA產品基本原理同somoa類似,

技術開創性領頭產品:simoa單分子蛋白檢測技術;

芯棄疾JX-8B數字ELISA產品參考simoa原理;Simoa®由現任于哈佛大學醫學院的DavidWalt教授作為科學創始人于2007年創立。DavidWalt是美國的工程院,藝術院和醫學院三院院士。2010年,DavidWalt將Simoa®技術以封面文章的形式發表在《NatureBiotechnology》上,此技術開始為大眾所知并引起業界轟動。 芯棄疾單分子ELISA檢測盒,微量極速檢測,微量檢測15min就完成檢測!

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    創新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數字ELISA應用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產品。循環血液轉化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發能夠測量這些蛋白質濃度的方法集中在蛋白質上的核酸標記復制,11,12或測量整體、結合標記蛋白分子的性質13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標記物,已將蛋白質的檢測范圍擴展至低飛摩爾水平;更近使用該技術的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達到的靈敏度然而,檢測蛋白質仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(PCR),從而限制了蛋白質組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質s1,2提供了一種有希望的方法。 芯棄疾單分子ELISA檢測盒,使用靈活開放,少于8孔即可測試,可使用客戶自研各用試劑!單分子陣列數字ELISA靈敏度

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只有少量分泌蛋白可測量的可能性突顯了蛋白質測量領域面臨的挑戰:醫學上相關的生物標志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測定仍然是是蛋白質生物標志物敏感和特異性測量的基礎。然而,傳統的免疫分析技術在檢測不可測量的生物標志物時靈敏度不足,這些生物標志物肯定位于當前可檢測范圍之下。主流的傳統免疫分析方法——包括酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、化學發光和電化學發光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強信號檢測、電感耦合等離子體質譜,但這些方法的數據表明其成功有限。非常規方法如亞飛摩爾級檢測具有明顯的權衡,例如程序較長或無法提供定量答案。
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標簽: 微流控芯片
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