較為常見的掃描電子顯微鏡模式是檢測由電子束激發的原子發射的二次電子(secondary electron)??梢詸z測的二次電子的數量,取決于樣品測繪學形貌,以及取決于其他因素。通過掃描樣品并使用特殊檢測器收集被發射的二次電子,創建了顯示表面的形貌的圖像。它還可能產生樣品表面的高分辨率圖像,且圖像呈三維,鑒定樣品的表面結構。掃描電子顯微鏡由三大部分組成:真空系統,電子束系統以及成像系統。真空系統主要包括真空泵和真空柱兩部分。真空柱是一個密封的柱形容器。目前掃描電子顯微鏡的較主要組合分析功能有:X射線顯微分析系統 (即能譜儀 , EDS) ,主要用于晶體和礦物的研究。江西細胞掃描電鏡拍照
掃描電子顯微鏡(SEM)是一種介于透射電子顯微鏡和光學顯微鏡之間的一種觀察手段。其利用聚焦的很窄的高能電子束來掃描樣品,通過光束與物質間的相互作用,來激發各種物理信息,對這些信息收集、放大、再成像以達到對物質微觀形貌表征的目的。新式的掃描電子顯微鏡的分辨率可以達到1nm;放大倍數可以達到30萬倍及以上連續可調;并且景深大,視野大,成像立體效果好。此外,掃描電子顯微鏡和其他分析儀器相結合,可以做到觀察微觀形貌的同時進行物質微區成分分析。掃描電子顯微鏡在巖土、石墨、陶瓷及納米材料等的研究上有普遍應用。因此掃描電子顯微鏡在科學研究領域具有重大作用江西細胞掃描電鏡拍照掃描電鏡這部分主要由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈、樣品室組成。
掃描電鏡在追求高分辨率、高圖像質量發展的同時,也向復合型發展,即成為把掃描、透射及微區成分分析、電子背散射衍射等結合為一體的復合型電鏡,實現了表面形貌、微區成分和晶體結構等多信息同位分析。近幾年隨著計算機、信息數字化技術的發展和在掃描電鏡上的應用,使得掃描電鏡的各種性能發生了新的飛躍,操作更加快捷,使用更加方便,是科學研究及至工業生產等許多領域應用較為為普遍的顯微分析儀器之一。掃描電鏡的制造是依據電子與物質的相互作用。當一束高能的入射電子轟擊物質表面時,被激發的區域將產生二次電子、俄歇電子、特征X射線和連續譜X射線、背散射電子、透射電子,以及在可見、紫外、紅外光區域產生的電磁輻射。同時,也可產生電子-空穴對、晶格振動 (聲子)、電子振蕩。
冷凍電鏡,就是用于掃描電鏡的比較低溫冷凍制樣及傳輸技術(Cryo-SEM)可實現直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。樣品經過比較低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣(噴金/噴碳)等處理后,通過冷凍傳輸系統放入電鏡內的冷臺(溫度可至-185℃)即可進行觀察。其中,快速冷凍技術可使水在低溫狀態下呈玻璃態,減少冰晶的產生,從而不影響樣品本身結構,冷凍傳輸系統保證在低溫狀態下對樣品進行電鏡觀察。假如觀察的是透過樣本的掃描電子的話,那么這種顯微鏡被稱為掃描透射電子顯微鏡(Scanning Transmission Electron Microscopy,STEM)。由于掃描電鏡入射電子與樣品之間的相互作用,各個方向發射的二次電子收集起來。
掃描電鏡由電子器發射出來的電子束,在加速電壓的作用下,經過磁透鏡系統匯聚,形成直徑為5nm,經過二至三個電磁透鏡所組成的電子光學系統,電子束會聚成一個細的電子束聚焦在樣品表面。在末級透鏡上邊裝有掃描線圈,在它的作用下使電子束在樣品表面掃描。 由于高能電子束與樣品物質的交互作用,結果產生了各種信息:二次電子、背反射電子、吸收電子、X射線、俄歇電子、陰極發光和透射電子等。這些信號被相應的接收器接收,經放大后送到顯像管的柵極上,調制顯像管的亮度。由于經過掃描線圈上的電流是與顯像管相應的亮度一一對應,也就是說,電子束打到樣品上一點時,在顯像管熒光屏上就出現一個亮點。 掃描電鏡就是這樣采用逐點成像的方法,把樣品表面不同的特征,按順序,成比例地轉換為視頻信號,完成一幀圖像,從而使我們在熒光屏上觀察到樣品表面的各種特征圖像。掃描電鏡樣品可以在樣品室中作三度空間的平移和旋轉,因此,可以從各種角度對樣品進行觀察。江西細胞掃描電鏡拍照
掃描電鏡不用于創建圖像的光,因為它形成造成的照片是在黑色和白色。江西細胞掃描電鏡拍照
掃描電鏡超薄切片實際上是樣品的二維切片,不能表達細胞的三維結構,而且在觀察切片后所拍攝的顯微照片時,容易造成錯誤的印象,用掃描電子顯微鏡( SEM )能直接觀察標本表面的三維空間結構,真實地反映各種細胞表面和斷裂面的形態特征,其照明源與透射電鏡基本相同,由電子器經聚光鏡匯聚成極細胞的電子探針,電子探針受掃描發生器控制,在樣品表面逐點逐線的掃描,樣品被電子轟擊所產生的二次電子被收集、轉換、放大,在電視熒光屏上同步掃描成像。二次電子的發射量與樣品的表面形態有關,從而在熒光屏上出現表面起伏的樣品立體圖像。掃描電鏡細胞樣品的預處理包括取材、固定、脫水等。江西細胞掃描電鏡拍照
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