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廣東掃描電鏡拍照

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023年06月22日

較為常見的掃描電子顯微鏡模式是檢測由電子束激發(fā)的原子發(fā)射的二次電子(secondary electron)。可以檢測的二次電子的數(shù)量,取決于樣品測繪學(xué)形貌,以及取決于其他因素。通過掃描樣品并使用特殊檢測器收集被發(fā)射的二次電子,創(chuàng)建了顯示表面的形貌的圖像。它還可能產(chǎn)生樣品表面的高分辨率圖像,且圖像呈三維,鑒定樣品的表面結(jié)構(gòu)。掃描電子顯微鏡由三大部分組成:真空系統(tǒng),電子束系統(tǒng)以及成像系統(tǒng)。真空系統(tǒng)主要包括真空泵和真空柱兩部分。真空柱是一個(gè)密封的柱形容器。掃描電子顯微鏡具有辯率高、景深大、成像立體感強(qiáng)的特點(diǎn)。廣東掃描電鏡拍照

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掃描電鏡超薄切片實(shí)際上是樣品的二維切片,不能表達(dá)細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu),而且在觀察切片后所拍攝的顯微照片時(shí),容易造成錯(cuò)誤的印象,用掃描電子顯微鏡( SEM )能直接觀察標(biāo)本表面的三維空間結(jié)構(gòu),真實(shí)地反映各種細(xì)胞表面和斷裂面的形態(tài)特征,其照明源與透射電鏡基本相同,由電子器經(jīng)聚光鏡匯聚成極細(xì)胞的電子探針,電子探針受掃描發(fā)生器控制,在樣品表面逐點(diǎn)逐線的掃描,樣品被電子轟擊所產(chǎn)生的二次電子被收集、轉(zhuǎn)換、放大,在電視熒光屏上同步掃描成像。二次電子的發(fā)射量與樣品的表面形態(tài)有關(guān),從而在熒光屏上出現(xiàn)表面起伏的樣品立體圖像。掃描電鏡細(xì)胞樣品的預(yù)處理包括取材、固定、脫水等。廣東掃描電鏡拍照1970年他發(fā)表了用掃描透射電鏡拍攝的鈾中的鈾原子和釷原子像,這使SEM又進(jìn)展到一個(gè)新的領(lǐng)域。

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掃描電鏡實(shí)驗(yàn)方法原理1. 生物樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu)易遭破壞。因此在進(jìn)行制樣處理和進(jìn)行電鏡觀察前必需進(jìn)行固定。以使其能較為大限度地保持其生活時(shí)的形態(tài)。而采用水溶性、低表面張力的有機(jī)溶液如乙醇等對樣品進(jìn)行梯度脫水,也是為了在對樣品進(jìn)行干燥處理時(shí)盡量減少由表面張力引起的其自然形態(tài)的變化。 2. 目前采用較為多、效果較為好的方法是臨界點(diǎn)干燥法。其原理是在一裝有溶液的密閉容器中,隨著溫度的升高,蒸發(fā)速率加快,氣相密度增加。液相密度下降。當(dāng)溫度增調(diào)到某一定值時(shí),氣、液二相密度相等,界面消失,表面張力也就不存在了。此時(shí)的溫度及壓力即稱為臨界點(diǎn)。將生物樣品用臨界點(diǎn)較低的物質(zhì)置換出內(nèi)部的脫水劑進(jìn)行干燥,可以完全消除表面張力對樣品結(jié)構(gòu)的破壞。 目前用得較為多的置換劑是二氧化碳。由于二氧化碳與乙醇的互溶性不好,因此樣品經(jīng)乙醇分級脫水后還需用與這兩種物質(zhì)都能互溶的「媒介液」醋酸戊脂置換乙醇。

掃描電鏡細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)冷凍割斷法 該方法簡便,結(jié)構(gòu)清晰,已得到普遍應(yīng)用。其操作方法如下: 1) 取材和固定:為了使細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,不被過多的血細(xì)胞污染,可在取材前用灌注法沖洗。即先將動物麻醉,經(jīng)腹主動脈注入生理鹽水或低分子量的右,切開下腔靜脈放血,至無血色為止。然后迅速取材,將樣品修成1mm×1mm×5mm大小,投入1%鋨酸溶液中固定1小時(shí),用1/15M磷酸緩沖液(pH7.4)清洗兩次,每次10分鐘。 2) 二甲基亞砜浸泡:將樣品依次放入25%、50%二甲基亞砜溶液中,各浸泡30分鐘。 3) 割斷:用TF—1型冷凍割斷裝置進(jìn)行割斷。然后將割斷后的樣品放到50%二甲基亞砜中,等融化后再用1/15M磷酸緩沖液浸洗,每次10分鐘,換液5次。 4) 軟化及后固定:將樣品放入0.1%鋨酸中軟化,溫度20℃,時(shí)間48~72小時(shí)。然后用1%鋨酸固定1小時(shí),雙蒸水浸洗1小時(shí),換液幾次,需徹底清洗干凈。 5) 導(dǎo)電染色:將樣品放入2%丹寧酸中2小時(shí)(或過夜),以雙蒸水清洗1小時(shí),換液幾次。雙蒸水清洗1小時(shí)。 6) 脫水、干燥及鍍膜:按常規(guī)方法進(jìn)行。英瀚斯提供場發(fā)射掃描電子顯微鏡 ,配備高亮度肖特基場發(fā)射燈絲,可以獲得高分辨率和低噪聲成像效果。

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掃描電子顯微鏡(英語:Scanning Electron Microscope,縮寫為SEM),簡稱掃描電鏡,是一種電子顯微鏡,其通過用聚焦電子束掃描樣品的表面來產(chǎn)生樣品表面的圖像。 顯微鏡電子束通常以光柵掃描圖案掃描。電子與樣品中的原子相互作用,產(chǎn)生包含關(guān)于樣品的表面測繪學(xué)形貌和組成的信息的各種信號,信號與光束的位置組合而產(chǎn)生圖像。掃描電子顯微鏡可以實(shí)現(xiàn)的分辨率優(yōu)于1納米。樣品可以在高真空,低真空,濕條件(用環(huán)境掃描電子顯微鏡)以及寬范圍的低溫或高溫下觀察到。掃描電子顯微鏡由三大部分組成:真空系統(tǒng),電子束系統(tǒng)以及成像系統(tǒng)。廣東掃描電鏡拍照

在掃描電子顯微鏡中,成象的信息主要是電子信息。廣東掃描電鏡拍照

**常見的掃描電子顯微鏡模式是檢測由電子束激發(fā)的原子發(fā)射的二次電子(secondary electron)。可以檢測的二次電子的數(shù)量,取決于樣品測繪學(xué)形貌,以及取決于其他因素。通過掃描樣品并使用特殊檢測器收集被發(fā)射的二次電子,創(chuàng)建了顯示表面的形貌的圖像。它還可能產(chǎn)生樣品表面的高分辨率圖像,且圖像呈三維,鑒定樣品的表面結(jié)構(gòu)。掃描電子顯微鏡由三大部分組成:真空系統(tǒng),電子束系統(tǒng)以及成像系統(tǒng)。真空系統(tǒng)主要包括真空泵和真空柱兩部分。真空柱是一個(gè)密封的柱形容器。廣東掃描電鏡拍照

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