裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。
造模方法:
1、細(xì)胞是貼壁細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細(xì)胞傳代培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞長至80-90%時,去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細(xì)胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,將細(xì)胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個細(xì)胞。
3、將細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個細(xì)胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機(jī)分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細(xì)胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。 實驗動物模型,常見問題匯總。寧夏提供實驗動物模型價格
卵巢早衰模型的建立
臨床的卵巢早衰(POF)是指卵巢功能提前減退,常見為女性在40歲以前出現(xiàn)閉經(jīng),以閉經(jīng),不育,雌***缺乏以及**水平升高為特征的一種疾病。在人群中發(fā)病率為1%~3%,在繼發(fā)性閉經(jīng)中占2%~10%,診斷以至少半年或半年以上閉經(jīng)多次發(fā)生,排除其他原因為基礎(chǔ),卵巢早衰是婦科分泌領(lǐng)域的常見病。
英瀚斯生物可承接各種生殖系統(tǒng)相關(guān)實驗動物模型。
一.實驗方法:
方法一:順鉑誘導(dǎo)大鼠卵巢早衰模型取雌性8周齡SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)7d。腹腔注射順鉑2mg/kg,連續(xù)注射7d。
方法二:環(huán)磷酰酸誘導(dǎo)大鼠卵巢早衰模型取雌性8周齡SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)7d。使用環(huán)磷酰酸給予腹腔注射,***次劑量為50mg/kg,以后8mg/kg連續(xù)注射14d。 云南構(gòu)建實驗動物模型哪家好實驗動物模型有哪些注意事項?
消化系統(tǒng)疾病動物模型
實驗動物模型靠譜公司,找英瀚斯生物,東南大學(xué)國家大學(xué)科技園。
1胃黏膜對卵白蛋白過敏引起的胃潰瘍
【操作步驟】3月齡以上的多**鼠,雄雌不限,3μg卵白蛋白和1mg氫氧化鋁的混合物溶解于0.2ml鹽水,腹腔注射。
【結(jié)果分析】非洲多**鼠的過敏性潰瘍的大體形態(tài)與人類的消化性潰瘍極為相似。多**鼠對研究胃病也是一種合適的動物,因為它還存在另外兩種與人類相似的情況,即有發(fā)生類*與腺*的傾向。多**鼠可從日、美等國的實驗動物供應(yīng)商處獲得。
2十二指腸潰瘍
【操作步驟】成年SD大鼠,雄雌不限,皮下注射丙腈或羥基乙胺200mg/kg,迅速引起進(jìn)行性十二指腸潰瘍。【結(jié)果分析】使用該方法制備的模型病理形態(tài)改變與人類患者相似,潰瘍見于球部前壁,直徑2~4mm,常引起穿孔或穿透到內(nèi)臟,小的潰瘍常位于球部后壁,穿透至胰腺。模型可用于十二指腸潰瘍的發(fā)病機(jī)理、實驗***的研究。
實驗動物模型的灌注取材方法:
小鼠灌注灌流
固定小鼠時我一般采用輸液器的針頭(4號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進(jìn)針,刺入心尖3~4毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約40毫升生理鹽水,后再灌流約20毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
英瀚斯生物,從動物模型造模、取材到后續(xù)病理切片染色、分子檢測一站式搞定!
大鼠灌注
按大鼠體重,用2%戊巴,比妥鈉(0.25ml/100g)進(jìn)行腹腔注射麻醉,開胸暴露心臟,向左心室內(nèi)注射1%肝素鈉0.2ml后經(jīng)左心室行主動脈插管,血管鉗固定后剪開右心耳,先以生理鹽水150ml快速沖洗血管,然后用4%多聚甲醛的0.01mol/LPBS(4℃,PH7.40)250ml灌注固定,先快后慢,共需時間為50min,之后取材,置4%多聚甲醛固定液后固定,在4℃冰箱內(nèi)保存。多聚甲醛進(jìn)入大鼠體內(nèi),大鼠會出現(xiàn)四肢、尾的抽搐,**終以肝臟發(fā)白、內(nèi)臟鼓起即灌注好。 英瀚斯生物,可做實驗動物模型病理檢測。
二型糖尿病實驗動物模型:胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞的功能缺陷胰島素分泌異常
誘導(dǎo)方法一:小劑量STZ加高脂飼料誘導(dǎo)糖尿病模型。高脂飼料喂養(yǎng)4周后,腹腔注射STZ(30mg/kg),1周后選空腹血糖大于11.1mmol/L。
英瀚斯專業(yè)承接實驗動物模型,歡迎實地考察實驗室,來電咨詢。
誘導(dǎo)方法二:轉(zhuǎn)基因老鼠db/db小鼠:糖尿病小鼠(C57BL/KsJdb/dbmouse)也為Jackson實驗室于1966年在C57BLKS/J(BKS)近交系中發(fā)現(xiàn)的自發(fā)性突變小鼠,該小鼠高糖、多尿及高尿糖水平的表型與人類的糖尿病患者非常相似。在10~14天出現(xiàn)高胰島素血癥,3~4周明顯肥胖,在10周時可達(dá)野生小鼠的2~3倍,但身長比野生型短5%,并有高膽固醇血癥和高甘油三酯血癥。4~8周出現(xiàn)高糖血癥,且表現(xiàn)出多食、消渴、多尿的典型糖尿病臨床表現(xiàn)。 實驗動物模型建立,就找英瀚斯生物。寧夏提供實驗動物模型價格
實驗動物模型后續(xù)檢測。寧夏提供實驗動物模型價格
實驗動物模型,癲癇動物模型。癲癇是一種常見多發(fā)的慢性腦部疾病,以腦部神經(jīng)元過度放電所致的突然出現(xiàn)反復(fù)和短暫的中樞的神經(jīng)系統(tǒng)功能失常為特征。形成癲癇的原因多種多樣,病理表現(xiàn)也各不相同。腦電圖上的癇性發(fā)放和臨床發(fā)作是癲癇的兩個主要特征。癇性發(fā)放是局部神經(jīng)元異常同步化活動在腦電圖上的表現(xiàn)。作為大腦神經(jīng)元活動的一種客觀反映,目前通過腦電圖檢查發(fā)現(xiàn)癇樣放電,仍是癲癇病診斷和癲癇灶定位的主要客觀依據(jù)。 由于受條件的限制,人體癲癇腦電數(shù)據(jù)的樣本收集比較困難,而且數(shù)據(jù)易受外界環(huán)境和患者運(yùn)動的干擾,一些實驗在道義和方法上也受到種種制約。如果能夠先在實驗室建立癲癇動物模型,通過對它進(jìn)行實驗并采集到大量樣本,以驗證現(xiàn)有算法的正確性,再進(jìn)一步轉(zhuǎn)向人體數(shù)據(jù),就能克服這些不足,縮減科研工作的周期。 鑒于大鼠是醫(yī)學(xué)研究中常用的一種實驗動物,并且國內(nèi)外已有幾種可供選擇的慢性癲癇模型,因此我們選擇成年Wistar大鼠為實驗對象,完成慢性顳葉癲癇模型的制備和數(shù)據(jù)的采集。寧夏提供實驗動物模型價格