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江蘇常見實驗動物模型

來源: 發(fā)布時間:2025年03月06日

裸鼠瘤模型是比較常見和常用的一種瘤動物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優(yōu)點。

造模方法:

1、細胞是貼壁細胞,細胞培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基中細胞傳代培養(yǎng):當細胞長至80-90%時,去除培養(yǎng)基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培養(yǎng)基中和胰酶終止消化,將消化的細胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min。倒掉上清后,加入3ml培養(yǎng)基重懸細胞,1:3傳代至培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。

2、將長到培養(yǎng)皿80%-90%的細胞用胰酶消化下來,1000rpm離心,去除上清,加入完全培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞分別種在6孔板中,每孔種1×105個細胞。

3、將細胞進行擴增培養(yǎng),對細胞進行計數(shù),將數(shù)量調(diào)整為2×107個細胞/ml。5、8周齡15只裸鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后,隨機分為3組,每組分別在右腋皮下接種2×106(100ul/只)細胞。接種約兩周后出現(xiàn)結(jié)節(jié),每周瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養(yǎng)4周后處死裸鼠,取裸鼠瘤拍照凍存。 小鼠實驗動物模型都有哪些?江蘇常見實驗動物模型

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雙轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游锬P汀@没虼虬屑夹g(shù)培育出的APP/PS-1雙轉(zhuǎn)基因鼠,在3月齡時出現(xiàn)學(xué)習記憶障礙、Aβ增多和形成SP,6月齡時即可出現(xiàn)嚴重的學(xué)習記憶力衰退、認知功能障礙,神經(jīng)元變性和突觸丟失等多種AD病理特性。對AD 病理特征Aβ和SP方面的研究主要采用APP/PS-1雙轉(zhuǎn)基因鼠。但其外源性基因表達不夠穩(wěn)定性、動物價格高。

APP/PS1/Tau 三轉(zhuǎn)因模型。APP/PS1/Tau 三轉(zhuǎn)基因小鼠模型是由APPSwe、PS1、TauP301L基因系突變建立的,首先在皮質(zhì)區(qū)和出現(xiàn)Aβ異常沉積、SP 和NFTs 形成,隨后海馬區(qū)也逐漸出現(xiàn) Aβ沉積、SP和NFTs,以及突觸丟失、神經(jīng)元變性AD臨床病理表現(xiàn)。APP/PS1/Tau三轉(zhuǎn)基因小鼠模型是目前與AD 病理特征接近的轉(zhuǎn)基因動物模型,但其外源性基因表達穩(wěn)定性較差、造模較困難且造價高。 浙江提供實驗動物模型外包公司英瀚斯生物,實驗動物模型多年經(jīng)驗積累!

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研究老年癡呆癥的實驗動物模型之化學(xué)損傷法中的東莨菪堿誘導(dǎo)模型。東莨菪堿(SCOP)為膽堿能拮抗劑,通過腹腔注射SCOP引起模型動物膽堿能系統(tǒng)功能障礙引起由于氧化應(yīng)激增加的認知能力的下降。由SCOP 誘導(dǎo)的癡呆模型被認為是揭示AD相關(guān)認知功能障礙的理想癡呆模型和金標準。由于此種模型造模方法簡單、費用相對較少、所以在對AD認知功能研究中應(yīng)用比較范圍很廣,缺點是動物模型缺乏AD神經(jīng)元變性、Aβ沉積等典型病理改變。

IBO 誘導(dǎo)模型,IBO 能對大腦產(chǎn)生毒性作用。特別是對大腦神經(jīng)元的毒性作用比較大,可以導(dǎo)致腦內(nèi) SP 沉積,行動呆慢,學(xué)習記憶能力衰退等病理表現(xiàn)。將IBO注入ChE傳遞和學(xué)習記憶能力的主要位Meynert基底核,通過谷氨酸受體特異激動膽堿能神經(jīng)元引起神經(jīng)元損傷、ACh 含量和ChAT活性降低,信號通路隨之調(diào)節(jié)異常,認知功能障礙等。在實驗研究中,IBO聯(lián)合Aβ 復(fù)制AD動物模型其臨床病理特征更明顯。

新一代AD(阿爾茲海默癥)實驗動物模型。盡管APP-Tg小鼠在過去十幾年中范圍廣的被用于開發(fā)新的AD醫(yī)療策略,但這種小鼠的基因表型和AD患者的還是不同。而且上述的轉(zhuǎn)基因動物模型在Aβ的生成、tau蛋白的過度磷酸化、神經(jīng)纖維纏結(jié)等病理特征上和AD患者的差異也很大,無法理想地模擬AD患者。為了克服這些不希望出現(xiàn)的問題,研究人員構(gòu)建了帶有Swedish(KM670/671NL)、Beyreuther/Iberian(I716F)和Arctic突變等APP基因敲入(APP-KI)小鼠。APP-KI小鼠在沒有過度表達APP的情況下生成Aβ42。隨著年齡的增長,APP-KI小鼠大腦皮層和海馬區(qū)出現(xiàn)過多的Aβ沉積。另一方面,與其他AD模型一樣,該模型沒有tau病理、NFTs、神經(jīng)退行性變或大量神經(jīng)元丟失可用于研究臨床前AD。由于基因組編輯的新的進展,尤其是CRISPR/Cas技術(shù),未來對轉(zhuǎn)基因動物模型進行改良也值得期待。常規(guī)實驗動物模型制作。

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 APP 轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游锬P停窠?jīng)細胞 β-淀粉樣前體蛋白(APP)轉(zhuǎn)基因動物模型是將人源性 APP 基因與小鼠基因組整合、表達和遺傳。與正常動物相比,APP 轉(zhuǎn)基因動物腦中Aβ表達過量,引起認知功能障礙等系列AD臨床病理特征。

·PDAPP小鼠模型·轉(zhuǎn)人類APP695swe和APP717V-F基因的PDAPP小鼠模型是由C57BL/6鼠與DBA/2F1鼠雜合而生。PDAPP小鼠APP表達水平高,6~9月齡時在模型小鼠大腦多區(qū)域表現(xiàn)出與AD相似的病理表現(xiàn),如細胞外Aβ異常沉積、突觸丟失、神經(jīng)炎癥反應(yīng)和小膠質(zhì)細胞增生等,但NFTs形成不明顯。由于PDAPP小鼠在同月齡腦中Aβ沉積異常,主要用于與Aβ相關(guān)的AD疾病機制研究。

·Tg2576小鼠模型·Tg2576小鼠模型是轉(zhuǎn)人類APP695基因小鼠,在9~12個月時表現(xiàn)出學(xué)習記憶功能減退,在大腦多部位逐漸出現(xiàn)Aβ沉積和形成老年斑,在皮層出現(xiàn)星形膠質(zhì)細胞聚集,該模型一般應(yīng)用于早期AD的研究。 英瀚斯生物 專業(yè)的實驗動物模型構(gòu)建平臺。江蘇常見實驗動物模型

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二型糖尿病實驗動物模型:胰島素抵抗和胰島β細胞的功能缺陷胰島素分泌異常

誘導(dǎo)方法一:小劑量STZ加高脂飼料誘導(dǎo)糖尿病模型。高脂飼料喂養(yǎng)4周后,腹腔注射STZ(30mg/kg),1周后選空腹血糖大于11.1mmol/L。

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誘導(dǎo)方法二:轉(zhuǎn)基因老鼠db/db小鼠:糖尿病小鼠(C57BL/KsJdb/dbmouse)也為Jackson實驗室于1966年在C57BLKS/J(BKS)近交系中發(fā)現(xiàn)的自發(fā)性突變小鼠,該小鼠高糖、多尿及高尿糖水平的表型與人類的糖尿病患者非常相似。在10~14天出現(xiàn)高胰島素血癥,3~4周明顯肥胖,在10周時可達野生小鼠的2~3倍,但身長比野生型短5%,并有高膽固醇血癥和高甘油三酯血癥。4~8周出現(xiàn)高糖血癥,且表現(xiàn)出多食、消渴、多尿的典型糖尿病臨床表現(xiàn)。 江蘇常見實驗動物模型

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